Percoll非连续性密度梯度离心法_百度文库
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Percoll非连续性密度梯度离心法
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&&医学类 有关分离细胞
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【求助】Percoll 分离细胞
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这个帖子发布于6年零161天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
文献报道50%Percoll 水平离心机10000转 40分钟后细胞可以分层，这样就可以把细胞分离开，自己尝试数次都没有成功。（Percoll 没有问题）百思不得其解，哪位做过这方面试验，麻烦指教，不胜感激！
不知道邀请谁？试试他们
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只有一个浓度是无法分层的。一个浓度分离结果很简单呀，沉淀的和上清中的细胞不是已经分开了的细胞吗？得到沉淀很简单。要得到上清中的细胞只需要加PBS稀释一下再离心就可以得到沉淀了。另外，10000转速度太高了，你是不是算错了。
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同意楼上的。。。。10000转。。。即使有Percoll也太高了，细胞不全碎了？
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感谢楼上两位参与讨论。我参考的是外文文献上的方法。Percoll分离细胞分为连续梯度和不连续梯度两种。连续梯度就是先配置成50%浓度，10000转离心，40分钟后percoll就会自动分层（自上而下）。细胞也会停留在各层。不连续梯度法是先配好不同浓度，依次叠加于管中，然后加上细胞，3000转离心，细胞就会停留在不同浓度层面。希望大家继续参与讨论，赐教！！谢谢
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没有对连续梯度或不连续梯度产生疑问，而是离心力。。。。一般来说，没有percoll存在下，1000rpm以上细胞就很难保持完整了，超过2000rpm，细胞还不都碎了？即使percoll有一定保护作用，但是10000rpm？这个时候离心力是多少了？用的什么离心机？
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为什么细胞培养的书上写的培养间充质干细胞的时候用1500rpm离心啊？那不是离死了~
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请问一下各位高手，用Percoll分离法得到的小鼠肝脏单个核细胞是否含有淋巴细胞和DC细胞？得到的单个核细胞细胞又需要怎么培养？非常感谢！！
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windcanaring 为什么细胞培养的书上写的培养间充质干细胞的时候用1500rpm离心啊？那不是离死了~不同的离心机不同的转速其离心力是不一样的。不过，一般的离心机，1500转是绝对不会有问题的。一般，大的离心机速度不要超过3000转，小的离1.5ml离心管的离心机速度不要超过7000转，否则细胞很可能都死了。
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活细胞应该好些，转速高点问题不大，Fix的细胞更脆弱些，但是我还是觉得10000rpm实在是太高了。。。。
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我们离心;400g,30min, 2:3分离液：血液。
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我用的是beckman超速离心机，水平转头JA-10，跟文献上报道的一样。
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请问PERCOLL液能不能用fecoll液代替啊，肝脏淋巴细胞分离的？
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