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超高效液相色谱（UPLC）
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主题：【讨论】什么才是真正的超高效液相色谱系统，几家ＵＰＬＣ参数对比！
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wangyijun1547
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作梯度时基线波动特别大，技术没有HPLC成熟
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原文由 wangyijun1547(wangyijun1547) 发表:作梯度时基线波动特别大，技术没有HPLC成熟这个是不是与方法有关，色谱条件没有设置好，还是仪器本身的原因？
我是谁2000
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楼主似乎有点偏见啊！似乎忘了我们日立也有UHPLC类型的仪器！我们的型号叫LCU，具体介绍可以参考以下链接，性能不落后于楼主推荐的：/hplc/product/LCU.asp
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原文由 我是谁2000(姜振喜) 发表:楼主似乎有点偏见啊！似乎忘了我们日立也有UHPLC类型的仪器！我们的型号叫LCU，具体介绍可以参考以下链接，性能不落后于楼主推荐的：/hplc/product/LCU.asp版友可能有误会，我没有推荐任何一款，只是进行一下参数对比，到底达到什么样的要求才能称得上是超高效液相色谱，您也可以就些作出你的看法，你也可以提供日立的具体参数进行对比，你觉得日立达到了要求吗？日立公司设计LaChromUltra的目标就是为用户提供一款用户界面友好、操作触手可及的LC系统。这套系统能够为用户提供超高速液相色谱分析的优异性能，而且正如用户所预期的，在适用性、可靠性等方面可以与常规HPLC系统相媲美。& & 为了实现这一目标，在设计理念上就需要在色谱柱填料颗粒尺寸和最优化的系统设计之间平衡，而不是设计一套封闭的、结构复杂的系统。& & 使用填料颗粒尺寸为2μm的色谱柱，以及适度的、较高的系统耐受压力(60MPa，约8700psi)，日立公司实现了缩短90%的分析时间，并且保持了很高的系统分离度和分离效率。这套系统如同常规HPLC一样，非常容易操作。在今天的实验室日常工作中，仪器的灵活使用非常重要，日立LaChromUltra可以轻松扮演“超高速液相”和“常规液相”两个角色！& & 【 其他关键优点包括 】1) 系统采用独特的自适应式手紧通用接头，使更换色谱柱、 改变分析方法等变得非常简单2) “梯度先行功能”可以消除延迟体积的影响，大大提升系统性能3) 多种类型的检测器和附件满足用户苛刻的应用需求& & 使用LaChromUltra独特的自适应式手紧通用接头，使更换色谱柱、改变分析方法等变得非常简单& & ● 无需工具，用手拧紧即可承受超过最高60MPa的系统压力而不发生泄漏& & ● 针对不同色谱柱，卡套位置可以前后调节，因此管子可以精确地固定在色谱柱前端，完全消除系统死体积& & 【标配的卡套材料采用Vespel(聚酰亚胺)，也可以采用PEEK(聚醚醚酮)材料】& & 与常规HPLC一样，易于使用与维护& & ● 正如用户所预期的，LaChromUltra在可靠性、适用性等方面可以与日立常规HPLC系统――LaChrom Elite (LCE)相媲美注：L-2300/L-2350柱温箱和组织器在LaChromUltra与LaChrom Elite之间可以通用& & ● LaChromUltra与LaChrom Elite也可以共享相同的软件控制平台――EZChrom Elite for Hitachi Ver.3.1.8！& & ● 在线脱气装置与高压梯度单元安装于L-2160U泵内部，减小实验台占用空间智能化的系统设计缩短管路长度，大大减小系统滞后体积。& & ● 泵内置标配的柱塞清洗附件，缩短维护与停机检修时间含盐缓冲液和其它腐蚀性的流动相会对密封圈和柱塞杆造成损坏。标配的柱塞清洗附件与自动进样器相配合，可以进行自动清洗，减少停机时间，提高工作效率。& & ● 与LaChrom Elite一样，LaChromUltra也可以从仪器前部对所有的可更换部件进行操作，使日常的例行维护保养非常简单。
22:23:29 Last edit by xky0230699
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赛默飞世尔 Transcend液相色谱系统 结合了在线提取的能力、多维色谱的速度以及业界唯一真正独立、平行、多通道的UHPLC系统。专利TurboFlow&#8482; 技术§& & & &
最小化样品制备-生物样品直接注入到液相色谱/质谱系统§& & & &
有效降低离子抑制-通过高特异性§& & & &
节省时间-通过简化复杂的样品制备过程§& & & &
简化方法开发 -可将相同方法应用于不同的基质独一无二的多路复用技术§& & & &
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Thermo Scientific Aria操作软件§& & & & & Thermo Scientific 自动进样仪§& & & & & Thermo Scientific Accela 泵（组）§& & & & & Thermo Scientific 阀接口模块§& & & & & 自定义电子器件创新的动力反馈控制（FFC）*技术可以在所有运行条件下提供精确的流速和梯度：[list=square]无需脉冲阻尼器，极低的液流脉冲（低于0.5 bar amp.）即可确保平滑的检测基线 在评估实际溶剂可压缩率的基础上，连续调节阀计时和泵效 增强了四元泵的灵活性，确保其无与伦比的优异性能 [list=square]最大流速为2mL/min，而最大操作压力为1250 bar，延迟体积仅为65&L，U-HPLC应用的最佳选择
9:11:41 Last edit by xky0230699
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PE：Flexar FX-10 UHPLC 、Flexar FX-15 UHPLC&
上市时间：2009年1月输液泵泵可配置为：Flexar单元泵、Flexar双元泵、Flexar四元泵、Flexar FX-10 UHPLC 超高压泵、Flexar FX-15 UHPLC 超高压泵 更快速的分析样品，没有间断。 适应多种分析流速 使用Flexar FX-10和FX-15超高效液相色谱泵可将通量提高10倍 减少10到15倍的溶剂消耗，减低废液排放，减少操作成本，兼顾效率和环保。 在实验室本地即可实现从单元泵、双元泵到四元泵的升级 配有氘灯或钨灯的双光束光学设计 多种检测器可配置为：Flexar 紫外/可见 检测器、Flexar FX-紫外/可见(UHPLC)检测器、Flexar PDA二极管阵列检测器、Flexar FX-PDA二极管阵列 (UHPLC)检测器、Flexar示差检测器、Flexar荧光检测器 Flexar光电二极管阵列检测器 & & & 优异的性能，适用于高效液相色谱或超高效液相色谱& & & 改进并降低了噪音水平，同时具有广泛的线性范围和优异的稳定性& & & 配备了高效2.4 μL样品流量池和优化的检测器电子元件Flexar荧光检测器 & & & 在大多数要求严格的应用中都能获得绝佳优异的灵敏度Flexar 示差检测器 & & & 对不具有高紫外线吸收特性的化合物进行高度稳定、高度灵敏的检测& & & 具有自动归零和自动清洗参考池的功能，可以执行可靠的无人分析& & & 样品流量池具有温度控制功能，提高了检测器的稳定性Flexar 紫外/可见光检测器 & &
类型广泛的样品流量池，从常规的 10 mm 流动池直到高效微型样品流量池，可以获得超高效液相色谱峰的高分辨率。& &
FX 型号检测器具有100 pts/sec 的检测速度，可以很好的与超高压液相色谱分析应用所配合。进样系统可配置为：Flexar LC 手动进样阀、Flexar LC 自动进样器、Flexar FX UHPLC 自动进样器 进样精度更高 一流的超高速进样循环时间。广泛的进样体积范围。卓越的进样可再现性。满足您提高样品通量和效率的需求。 FX 超高效液相色谱仪自动进样器可在高达 18,000 psi 的压力下进行小至 1 μL 的进样。 载入样品仅需 8 秒 三种进样模式：定量管全充满模式、定量管部分充满模式和微升提取模式，完全没有浪费样品 使用 Peltier 冷却/加热模式配件可在 4°C 到低于室温 3°C 的范围内进行操作。即使在室温高达 25°C 的情况下也可获得 4°C ± 2°C 的温度，获得更精确的温度控制 安全、灵活、准确的柱温箱可配置为：Flexar LC 柱温箱、Flexar Peltier 半导体制冷柱温箱、Flexar Peltier LC 带切换阀的半导体制冷柱温箱 精确的温度控制可获得更好的色谱柱性能和更好的保留时间重复性。 拥有标配的漏液报警功能 流畅的操作空间 三种型号：标准柱温箱、半导体（加热和冷却）的柱温箱，半导体（加热和冷却）并具有色谱柱选择/切换功能的柱温箱 温度范围为 30°C 到 90°C（Peltier 为 5°C 到 90°C），并可在整个温度范围中将温度控制在 ±0.2°C 以内 大容积、拆装方便的色谱柱室可容纳长至 30 cm 规格的色谱柱 溶剂管理器可配置为：Flexar溶剂管理器、Flexar 带三通道脱气机的溶剂管理器、Flexar带五通道脱气机的溶剂管理器 便捷和安全的Flexar溶剂管理系统，并可即插即用地实现各部分的连接 可拆卸的托盘 包含整瓶的breach 三种型号：不带有脱气机、带有3通道脱气机型、带有5通道脱气机型 软件选择解决方案 Chromera and TotalChromCHROMERA CDS 色谱数据系统 实用向导功能 点击色谱图时，能够自动把数值输入到软件识别系统中。 决定点功能可以自动停止序列的运行，以便于您能够检查参数并作相应的调整。 报告向导提供各种报告标准模板以及用户自定义编辑报告的便利性。专门针对超高压液相色谱的特定需求研发的Chromera软件：功能强大、简单易用 专利的“设备描述符”（device descriptor）技术会自动更改用户操作界面以正确反映所选择的设备组配置 方法编辑可即时完成，并立即反应在状态讯息中 可在分析期间延长分析运行时间，简化您的方法开发过程 模块化设计和直观的“一次点击”式导航简化了操作并使数据寻找更为便捷 界面提供“仿真”式的仪器控制--如同在仪器的面板前实际进行操作 可以以单色谱图模式、重叠色谱图模式和网格色谱图模式来观察数据。数据的3D图片可以呈现动态效果。 & TotalChrom――公司用户的方案 即使处理海量数据，TotalChrom的峰识别，计算功能也能够满足各种色谱数据方法开发的需要，使用TotalChrom CDS使您建立方法时更快更容易。 可伸缩的软件结构 可以在单机或联网环境下工作 可以满足21CFR法规要求 可以控制仪器并处理数据
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JASCOX-LCTM超高压快速液相色谱仪X-LC 3185PU PumpPulse-free solvent pumps delivery operate at pressures approaching 15,000 psiThe X-LC 3185PU solvent delivery unit is designed to operate at pressures approaching 15,000 psi for either gradient or isocratic elution modes. The SSQD (Slow Suction, Quick Delivery) pumping system provides durable, accurate and pulse-free operation. This simple design utilizes only two plungers and two check valves for optimum reliability and ease of maintenance. Versatile programming capabilities allow the use of sophisticated time-based programs for isocratic, binary or ternary gradient elutions.X-LC WIDE RANGE OF DETECTORSJASCO offers an ever-growing range of X-LC and HPLC detectors offering maximum sensitivity and operating stability, which includes the world’s only circular dichroism based detector for chiral detections and the most sensitive scanning fluorescence detector on the market today.X-LC 3120FP Fluorescence DetectorThe X-LC 3120FP fluorescence detector is the industry’s most sensitive detector and has an excellent signal-to-noise ratio with proven stability and a wide wavelength range (220-700 nm) for both excitation and emission. Advanced optics, holographic concave diffraction gratings, and non-spherical mirrors are cleverly incorporated in a compact package resulting in extremely efficient and reliable fluorescence detection.X-LC 3177UV UV-Vis DetectorThe X-LC 3177UV has a unique design separating it from conventional UV detectors, incorporating a 36-element photo-diode array. The 3177UV offers maximum sensitivity and selectivity to allow simultaneous monitoring of chromatograms at four different wavelengths or three wavelengths and a ratio of two others.X-LC
UV-Vis DetectorsTo ensure the most sensitive and stable X-LC detection, these models utilize a Czerny-Turner monochromator covering a wide wavelength range from 190 to 900 nm with deuterium and halogen lamps (X-LC 3170UV) and from 190 to 600 nm with a single deuterium lamp (X-LC 3175UV). The excellent optical characteristics and program capabilities of the X-LC UV are combined in one compact package, making the X-LC UV the optimal tool for X-LC UV/Vis detection. To efficiently detect the much narrower peaks that are obtained using X-LC, the X-LC UV detectors are capable of data acquisitions at frequencies up to 100 data points per second.X-LC 3195CD Circular Dichroism Chiral DetectorThe X-LC 3195CD Circular Dichroism Chiral Detector is an innovative CD (Circular Dichroism) detector for X-LC, using the same technology applied in conventional CD spectropolarimeters. The 3195CD enables highly sensitive and selective detections of chiral compounds. It can simultaneously determine both CD and UV absorption of the sample in the same cell, and determines optical isomer separation and purity. To meet X-LC requirements, the 3195CD features a high-speed sampling rate of 50 data points/sec, for both CD and UV signals, and its specially designed flow cell minimizes peak broadening.X-LC 3110MD Photo Diode Array Detector (PDA)The X-LC 3110MD PDA Detector offers maximum sensitivity with ultra high-speed data acquisition and processing. Designed specifically for use in ultra high-speed separations arising from UHPLC applications, the X-LC 3110MD is on the cutting edge of PDA detector development. Display functions such as 3-D chromatograms, contour plotting, peak purity, multi-wavelength chromatograms and spectral search are all supported.X-LC SUPPORT MODULESX-LC 3180-32MX Dynamic MixerThe X-LC 3180-32MX three-solvent dynamic mixer provides efficient mixing of solvents for binary and ternary gradient work at pressures approaching 15,000 psi.X-LC 3080DG DegasserThe X-LC 3080DG four-line degasser eliminates dissolved gases in up to four mobile phase inlet lines.X-LC 3159AS Intelligent AutosamplerThe X-LC 3159AS autosampler is a fully automatic sample injection system with a minimum injection interval of 30 seconds. It enables greater productivity and the highest possible level of precision. Sampling flexibility with up to 768 well positions (two 384-well microplates) is an option for laboratory automation and combinatorial chemistry. Also available is a micro-vial rack (224 vials) or the standard rack (120 vials) for 2 mL vials.X-LC 3067CO Column OvenThe X-LC 3067CO is a compact column heater/cooler employing an aluminum block design. Its temperature control range is from -15°C below ambient temperature to 65°C using Peltier elements.
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CVC Nano XPLC创新精密纳升流速及耐15,000psi超高压系统之CVC-MiroTech XPLC；在微量溶剂系统下，能检测微量样品，具有高分析效率、高准确度及高再现性之特质，可应用在新兴的蛋白质体学中之生命科学研发需求、代谢体学及药物开发等方面的研究。主要特点:高再现性：采用专利的闭锁式回路数码控制（Closed loop digital control） 耐超高压：可耐压力高达15,000psi 高选择性：具有二元、2D及双二元高输出之多元性选择 高灵敏度：sub-fetamole detection 高分辨率：耐15,000psi，可应用100公分的管柱，提升分辨率 分析速度快：耐高压系统、高流速、短色谱柱及1.7μm粒子填充色谱柱的应用
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我感觉UPLC是waters率先提出的概念，后来被其他公司所“盗用”，呵呵，只不过换个名字而已。我觉得，压力在800 bar以上才能算作真正的UPLC，但是一般情况下，有个550-600也就够了，所以安捷伦的1260和戴安的UHPLC+也都可以列为准UPLC关于粒径问题，我觉得2.2算是一个中介值，一位追求小粒径会造成一种乌托邦式的竞争，好似美苏的星球大战一样，看上去很美，但是最终花了很大力气，解决不了什么实际问题不过我确实觉得安捷伦的1260和戴安的UHPLC+确实是不错的东西，价格也不高，也可以算作入门级的UPLC吧，呵呵
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主题：【讨论】【参数解读】超高效液相色谱仪器性能和技术参数解读
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发表于： 20:41:45
超高效液相色谱（Ultra Performance Liquid Chromatography\ UPLC）是分离科学中的一个全新类别，UPLC借助于HPLC（高效液相色法）的理论及原理，涵盖了小颗粒填料、非常低系统体积及快速检测手段等全新技术，增加了分析的通量、灵敏度及色谱峰容量。超高效液相色谱是一个新兴的领域，作为世界第一个商品化UPLC产品的Waters ACQUITY UPLCTM 超高效液相色谱系统在1996年问世，之后像安捷伦、岛津等公司也陆续开始生产超高效色谱仪。目前，超高效液相色谱仪已经开始逐渐地投入液相实验中。如图：HPLC与UPLC分离比较◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆列举部分仪器的个别参数，供参考：技术参数：泵系统：最大操作压力 15000psi（1mL/min）流速范围：0.001-2.000mL/min, 增量0.001mL；流速精度：0.075% RSD；流速准确度：±0.5%；梯度准确度：± 0.3%；梯度精度：0.15%RSD；压力范围：0-15,000 psi；真空脱气机：在线真空脱气，六通道均可在线脱气，有自动柱塞清洗和进样针清洗功能。温控自动进样器:进样精度：&0.3%RSD；进样准确度：±1 μl；进样线性度：& 0.999；进样体积：0.1 to 50 μL，增量0.1μL；样品污染度：&0.004%；样品温度范围：4°C -40°C，增量：1°C，带制冷功能；温控稳定性：±0.5℃；样品盘数：96，384 两种规格；样品瓶：2mL样品瓶，0.65mL,1.5mL两种规格的离心管。柱温箱：温度范围：室温以上5°C -90°C；控温精度：±0.1°C；温度准确性±0.5℃。二极管阵列检测器：二极管数：≥1024；波长范围：190-800 nm；分辨率：≤1.2 nm；波长准确度：≤±1nm；波长精度：≤±0.1nm；基线噪音：＜±1.0×10-6AU；基线漂移：＜1×10-4AU/h；最大采集频率：≥100 Hz；检测器配置 紫外可见检测器、光电二极管矩阵检测器、蒸发光散射检测器〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓分割线〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓请您来解析：1、一套真正的UPLC哪些技术参数是支撑？有哪些是其标志性参数？2、耐高压系统评价：要求能耐多少压力以上才算UPLC，真的是超过15,000psi才算吗？2、泵系统控制精确的流速，相对标准偏差要求在多少之内才算稳定？梯度延迟时间等？3、小内径小填料色谱柱，用什么规格的最合适？4、高灵敏小检测池的检测器，检测器的耐压，都与普通LC检测器有哪些区别？5、你的仪器快速进样系统都是如何来实现高通量进样的？6、超高效液相的仪器性能，你最看重哪些参数，你实际使用的仪器感觉都有哪些性能不足？欢迎大家参与讨论，补充自己想交流的参数，说说自己的认识或者提出自己的疑问！！！往期回顾：
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20:43:52 Last edit by emoc98311
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从图上看分离度比较高，UPLC比HPLC价格上高多少。
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原文由 老多_小多(emoc98311) 发表:请您来解析：1、一套真正的UPLC哪些技术参数是支撑？有哪些是其标志性参数？2、耐高压系统评价：要求能耐多少压力以上才算UPLC，真的是超过15,000psi才算吗？2、泵系统控制精确的流速，相对标准偏差要求在多少之内才算稳定？梯度延迟时间等？3、小内径小填料色谱柱，用什么规格的最合适？4、高灵敏小检测池的检测器，检测器的耐压，都与普通LC检测器有哪些区别？5、你的仪器快速进样系统都是如何来实现高通量进样的？6、超高效液相的仪器性能，你最看重哪些参数，你实际使用的仪器感觉都有哪些性能不足？老多老师威武，一下子就整这么多问题出来。我没用过UPLC，了解的也不多。
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老多老师辛苦了！我没用过UPLC，不好评价，希望以后能有机会接触吧
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ID：cdl1568
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只有waters的超高效叫Uplc，而且是2004年推出的，好像Alliance是1996年推出的
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原文由 cdl1568(cdl1568) 发表:只有waters的超高效叫Uplc，而且是2004年推出的，好像Alliance是1996年推出的安捷伦的有这么早吗？我也是听说waters的是最早的吧？
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其支持性参数，我觉得是高压（远高于hplc，使其有更高的分离度、更短的分离时间），较小的死体积。UPLC的检测器与普通的不一样吗？
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是Waters在2004年最先推出的UPLC，1996年的Waters推出的Alliance HPLC系统，不是安捷伦哦
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UHPLC的标志性特点就是压强高，进样量少，死体积小，流速慢，出峰快！
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1290 和 UPLC的泵 都是双电机驱动的。这可能也是潮流了吧。把输出流量的平稳性做到极致。我觉得对UHPLC来说，重点还是流量的精准和耐压吧，还有就是延迟体积小，响应时间要够快。别挂个2ml的混合器（某S公司），这样泵再牛X都没用。DAD检测器也很有门道，要达到更高的灵敏度和信噪比，目前的潮流是全反射光纤流通池。貌似Agilent的是 TeflonAF管的材质（比金子都贵的材料呀），也有用石英光纤的。Waters的流通池貌似改过几版，老一些UPLC上的是挂在外面的粗棒子，新的放在机箱内了。对UHPLC来说，我觉得提升最多的 还是泵和检测器（当然柱子就不用说了）。其他的模块貌似没有太大变化。
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xiaowang268
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uplc相比一般的液相，主要还在于柱子和较高的耐压系统}