PCR扩增程序设置是否有问题
进行PCR扩增反应;设置程序三段:分别为段一93℃2分钟、段二93℃45秒钟
一55℃ 60秒钟10个循环、段三93℃30秒钟一55℃45秒钟30个循环.SLAN分析仪系统自动对实验数据进行分析处理.
这个程序设置有问题吗?
过程中生成菌落pcr引物二聚体体回收再利用的研究
过程中生成的菌落pcr引物二聚体体(
琼脂糖凝胶电泳切胶回
过程中生成的菌落pcr引物二聚体体,分光光度计
为模版不同浓喥的回收产物为引物进行
琼脂糖凝胶电泳,目的条带切胶回收并测序结果
处出现特意条带,其核苷酸序列与
二聚体可以作为特异性引物囙收再利用
;特异性引物;菌落pcr引物二聚体体;回收再利用
端不依赖模版相互作用生成大量非特异性产物,尤其是菌落pcr引物二聚体体
3’端只要有一个碱基互补配对
。许多实验通过引物的优化设计、控制反应条件、热启动和酶的优化等
方法来减少菌落pcr引物二聚体体的生成
但引物浓度较高时,这些方法不能减少
菌落pcr引物二聚体体的生成因此,菌落pcr引物二聚体体被认为是
反应过程中的必然产物
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