口腔粘膜上皮细胞DNA提取操作步骤大神们求帮忙，人口腔粘膜上皮细胞用什么方法能成功提取出DNA啊，能成功跑出电泳条带的，求具体操作步骤。ps:最好是煮沸法或碱裂解法的，试剂盒用不起啊
提取口腔粘膜DNA方法
用清水漱口，使口腔清洁。
盒内有两管和取样小棍, 1号平底及2号尖底. 取出1号管，立于桌上, 等盖上溶液集中到管底。小心地把盖打开。
取出带齿的DNA收集小棍，
伸入口腔内...
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Gp2D：人结肠癌细胞
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ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系
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Gp2D：人结肠癌细胞
【(/invest/)编号】 C1528
【中文缩写】 Gp2D细胞
【中文名称】 Gp2D(人结肠癌细胞)
【背景资料】 见细胞说明书
【产品来源】 细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系
&(/company/)提供贴壁、半贴壁、悬浮、半悬浮、贴壁与悬浮混合等细胞特性，一般细胞培养PBS量是10%，如果出现细胞状态不良情况，可以提高PBS量到15%，待细胞稳定后，调回PBS量10%，对于初次实验者，一般细胞培养，都需要加入双抗防止细胞污染，细胞汇合度达到90%，我们开始寄送，Gp2D：人结肠癌细胞这样可以保持细胞收到时，良好的细胞活力。复苏细胞注意事项：
1收到细胞后当天换液，全部更换成客户自己的新鲜培养基，放进培养箱，第二天再消化。
2边观察边消化，根据细胞的形态，终止消化时间，采取以半分钟间隔吹打细胞边缘，如可吹打下来，即终止消化。客户摸索比较好的消化时间。
3随细胞有一份细胞操作说明书，请客户仔细查看。
4记得加1%双抗，降低被污染的概率。另外尽早冻存留种，以备后用。
5售后时间为一周，仅限于细胞本身的质量问题，而因乙方自己不当操作（不规范操作，消化过度，不加双抗导致的污染等）导致的细胞问题不在售后范畴。
6收到细胞后，如细胞状态不佳，或培养中遇到问题，烦请当天尽快联系，以便处理。当天及时反馈细胞情况和细胞照片是售后跟踪处理重要的参考依据，请您务必重视。
7刚收到细胞时，胎牛血清可以用15%培养两三天，利于细胞尽快恢复状态，细胞状态稳定后，再调回10%即可。
（其中1,2条针对于贴壁细胞，悬浮细胞详情请见细胞操作说明书）& P4
【产品(/sell/99/)】 复苏T25培养瓶(一瓶)或冻存1ml冻存管（两支）
【产品规格】 1*10（6）
【安全级别】 1
【产品种属】 人
【组织来源】 结肠
【细胞形态】 上皮细胞样
【细胞特性】 贴壁
&细胞培养基的选择和使用：
MEM：成分简单，贴壁细胞首选。
DMEM：分高糖型和低糖型。
IDMEM：适合细胞密度低，生长困难的细胞。如杂交细胞的筛选，DNA转染后转化细胞的筛选培养。
RPM1640：应用最广泛的培养基之一。悬浮细胞培养首选，主要针对淋巴细胞，也适合其他细胞。
199、109培养基：成分齐全，培养效果较好。
F10培养基：Gp2D：人结肠癌细胞适合小鼠及人类二倍体细胞培养。
F12培养基：适合单细胞分离培养及无血清培养。
McCoy&s5A培养基：特别适合原代细胞及较难培养细胞的生长。& 95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
【细胞(/sell/76/)】 细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
【培养条件】 详见细胞说明书
【传代方法】 建议1:2-1:3 两天换液一次
【冻存条件】 详见细胞说明书
【主要文献】 请具体查阅相关发表文章
细胞传代培养的胰酶消化法：
传代培养：是指细胞从一个培养瓶以1：2或1：2以上的比例转移，接种到另一培养瓶的培养。传代细胞，可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代，部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代，或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。
实验步骤：① 入无菌室之前用肥皂洗手，再用75% 的酒精擦拭消毒双手;
② 倒置显微镜下观察细胞形态，确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液37℃下预热。
③ 超净台台面应整洁，用75%酒精棉球擦拭清洁;
④ 打开超净工作台的紫外灯照射台面20min左右，关闭紫外灯，打开风机清洁空气除去臭氧;
⑤ 点燃酒精灯;取出无菌试管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内。
⑥ 将培养用液瓶口用75%酒精消毒，过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上。
⑦ 倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去残留的就培养基，或用少量胰酶涮洗一下。
⑧ 每个大培养瓶加入1ml胰酶，小培养瓶用量酌减，盖好瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶，使细胞脱离胰酶，然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中。
⑨ 加入少量的含血清的新鲜培养基，反复吹打消化好的细胞使其脱壁并分散，再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成细胞悬液，然后分装到新培养瓶中。盖好瓶盖，适度拧紧后稍回转，以利于CO2的进入，将培养瓶放回CO2培养箱。
⑩ 对悬浮培养细胞，步骤7-9不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清，加入新鲜培养基，然后分装到各瓶中。
① 传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次最好只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材。
②&Gp2D：人结肠癌细胞每天观察细胞形态，掌握好细胞是否(/article/7/)的标准：健康细胞的形态饱满，折光性好，生长致密时即可传代。
③ 如发现细胞有污染迹象，应立即采取措施，一般应弃置污染的细胞，如果必须挽救，可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗，随后培养基中加入较大量的抗生素，并经常更换培养基。
传代细胞的建系和维持：细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。
对每一个细胞系来说都有其自身的特点，要做好建系的维持必须记录好细胞档案,换液传代和做好细胞系的管理工作。ACC-477 CF-10H5 Cell 细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系，公司提供背景资料、生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息，我们拥有丰富的细胞系培养经验，能提供细胞培养全方位的技术支持，让您实验再无烦扰！
ACC-478 OTH-74D4 Cell 细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系，公司提供背景资料、生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息，我们拥有丰富的细胞系培养经验，能提供细胞培养全方位的技术支持，让您实验再无烦扰！
ACC-479 VIP-VIIIC8 Cell 细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系，公司提供背景资料、生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息，我们拥有丰富的细胞系培养经验，能提供细胞培养全方位的技术支持，让您实验再无烦扰！
ACC-480 SOM-4D10 Cell 细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系，公司提供背景资料、生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息，我们拥有丰富的细胞系培养经验，能提供细胞培养全方位的技术支持，让您实验再无烦扰！
ACC-481 ACH1P Cell 细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系，公司提供背景资料、生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息，我们拥有丰富的细胞系培养经验，能提供细胞培养全方位的技术支持，让您实验再无烦扰！
ACC-482 GH4-C1 Cell 细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系，公司提供背景资料、生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息，我们拥有丰富的细胞系培养经验，能提供细胞培养全方位的技术支持，让您实验再无烦扰！
ACC-483 HPB-ALL Cell 细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系，Gp2D：人结肠癌细胞公司提供背景资料、生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息，我们拥有丰富的细胞系培养经验，能提供细胞培养全方位的技术支持，让您实验再无烦扰！
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ACC-489 RH-30 Cell 细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系，公司提供背景资料、生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息，我们拥有丰富的细胞系培养经验，能提供细胞培养全方位的技术支持，让您实验再无烦扰！
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ACC-491 RH-18 Cell 细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系，公司提供背景资料、生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息，我们拥有丰富的细胞系培养经验，能提供细胞培养全方位的技术支持，让您实验再无烦扰！
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ACC-495 SU-DHL-4 Cell 细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系，公司提供背景资料、生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息，我们拥有丰富的细胞系培养经验，能提供细胞培养全方位的技术支持，让您实验再无烦扰！
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ACC-497 MEC-1 Cell 细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系，公司提供背景资料、生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息，我们拥有丰富的细胞系培养经验，能提供细胞培养全方位的技术支持，让您实验再无烦扰！
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ACC-500 MEC-2 Cell 细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系，公司提供背景资料、生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息，我们拥有丰富的细胞系培养经验，能提供细胞培养全方位的技术支持，让您实验再无烦扰！
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ACC-511 ALL-SIL Cell 细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系，公司提供背景资料、生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息，我们拥有丰富的细胞系培养经验，能提供细胞培养全方位的技术支持，让您实验再无烦扰！
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