HPLC测样黄体素浓度不够的原因越来越高是什么原因

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高效液相色谱法检测卷烟辅料中双酚A的含量
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【求助】HPLC测样浓度越来越高是什么原因?
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这个帖子发布于2年零241天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
本人8月8日跟课题组同门学习了一种生物表面活性剂surfactin的HPLC测试方法,该方法之前他一直在用,也比较成熟和稳定了,所用仪器是waters的2695 HPLC,当天试验时用同门此前做标曲时配的样,浓度测试正常。过了半个月,前天本人开始正式实验了,同样的方法,测试结果却十分不稳定。300mg/L的标样,做出来浓度低于标样实际配制浓度,大概在几十mg/L左右,随着反复测试,浓度变大,连续三次测得为320mg/L。我以为仪器比较稳定了,浓度的提高可能是因为标样中溶剂挥发造成的。今天打算正式测样,为保险起见,还是先做了这个300mg/L的样,结果连续几次测得的是270多、280多、290多,也就是说随着测试次数,浓度在不断提高。各位高人,这种情况可能是什么原因造成的?请指点一二,目前比较迷茫。
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1)将洗针溶剂更换为对样品溶解度更高的溶剂。若化合物是salt形式,注意加入少量的水。2)在操作界面使用needle wash方式多次清洗进样针。3)在方法设置界面,洗针方式中选择double或extend形式,让仪器在每次进样前多洗几次。4)在每次做含量前,平衡仪器时,多做几次purge injector,将injector中的溶剂置换为流动相。由于waters进样方式的问题,若不做purge
injetor在每次做含量时会有一针比一针高的问题的。这个具体原理你咨询工程师即可。
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您研究surfactin吗
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进针前purge injector 做10次试试,我怀疑进样器中有气泡,导致吸样不准确。
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你好,我也想做生物活性物质的测定,但我们这没仪器,不知道你知不知道有哪个公司代测吗?多谢
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bestfuma 本人8月8日跟课题组同门学习了一种生物表面活性剂surfactin的HPLC测试方法,该方法之前他一直在用,也比较成熟和稳定了,所用仪器是waters的2695 HPLC,当天试验时用同门此前做标曲时配的样,浓度测试正常。过了半个月,前天本人开始正式实验了,同样的方法,测试结果却十分不稳定。300mg/L的标样,做出来浓度低于标样实际配制浓度,大概在几十mg/L左右,随着反复测试,浓度变大,连续三次测得为320mg/L。我以为仪器比较稳定了,浓度的提高可能是因为标样中溶剂挥发造成的。今天打算正式测样,为保险起见,还是先做了这个300mg/L的样,结果连续几次测得的是270多、280多、290多,也就是说随着测试次数,浓度在不断提高。各位高人,这种情况可能是什么原因造成的?请指点一二,目前比较迷茫。 标准曲线还是用的以前的吗
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【求助】高效液相色谱测含量时候的线性该怎么做?进样浓度怎么选?
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至少80%-120%供试浓度
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建议做75%到125%。因为回收率一班为80到120。实际称样时会有些误差。会导致回收率范围大于线性范围。所以配的时候就比回收率宽些会比较好。
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浓度范围80%到100%,至少五个点。我们通常会把范围做大一点,比如50到150,配置一个浓度较大的母液,然后稀释五个浓度,其中应包含供试品100%浓度。
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浓度范围80%到100%?
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药典上前80%到120%
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一般是你含测时样品浓度的80%~120%,至少5个点,要注意对照品的浓度也在范围之内,因为我们有个样品药典标准上对照品浓度和样品浓度相差较大,不再范围之内了。
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各大药典均有标注
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还是赞同楼上说的,lz先看看药典和各类指导原则,会少走很多弯路
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标准中定90-110%就算宽的,所以做80-120%一般就能满足要求,非要做50-150%也不能说不对。
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怎么样使用高效液相色谱测多肽浓度啊?
领域:生物技术
怎么样使用高效液相色谱测多肽浓度啊?
悬赏:3枚色谱币  回答:0  浏览:1179  提问时间: 16:28:51
大家好!我现在尝试用过纳米材料包装多肽药物,之后要测算包封率,必须先检测1溶液中多肽的浓度,查文献用HPLC比较准确,可是我不是很懂,请知道的帮我解答一下好吗?谢谢!
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