双孢菇蛋白粉废料中多糖的分离纯化及抗氧化活性研究--《食品工业科技》2018年03期
双孢菇蛋白粉废料中多糖的分离纯化及抗氧化活性研究
【摘要】：目的:分析双孢菇蛋白粉废料中多糖组分及抗氧化活性。方法:以双孢菇子实体提蛋白后残渣为材料,采用超声波热水浸提,Sevage法去蛋白,D101大孔树脂除色素和醇沉的方法制备粗多糖,通过DEAE-52层析柱对粗多糖进行分离纯化。通过扫描电镜(SEM)、红外光谱(IR)等方法对纯化后多糖进行理化特性鉴定;采用清除DPPH、超氧阴离子、ABTS自由基实验,以及对H_2O_2处理的酵母细胞的保护作用实验评价其抗氧化活性,并对H_2O_2氧化损伤的酵母细胞上清液中的T-SOD、MDA、GSH-Px三种酶活性进行检测。结果:从双孢菇粗多糖中分离纯化到三种组分,分别命名为ABPS-Ⅰ、ABPS-Ⅱ和ABPS-Ⅲ。研究显示,ABPS-Ⅲ清除DPPH自由基能力最强。ABPS-Ⅲ多糖的含量为89.12%,SEM特征呈现六面体结构,IR分析结果显示其具有明显的糖类化合物的特征。ABPS-Ⅲ清除DPPH自由基、超氧阴离子、ABTS自由基的EC50值分别为1.85、1.48、1.30 mg/m L。对氧化损伤酵母细胞保护实验结果显示,ABPS-Ⅲ可显著提高氧化损伤酵母细胞的存活率,在浓度为25 mg/m L时,保护率达到了42.58%;酶活性检测结果显示,添加ABPS-Ⅲ后,与氧化损伤组相比,酵母细胞上清液中T-SOD和GSH-Px的活力分别显著提高了337%和102%(p0.01),MDA含量则显著降低了35.17%(p0.05)。结论:双孢菇多糖ABPS-Ⅲ具有较强的抗氧化活性。
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【分类号】：TS209
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食用菌生产常见问题
食用菌菌种生产 200 问一、基础知识1、啥是食用菌？啥是药用菌？食用菌是一类可供人们食用的大型真菌，具有肉质、胶质或纤维质的子实体，俗称“菇”“蕈”“菌”“耳” 、 、 、 ，例如 香菇、平菇、猴头菌、黑木耳、银耳、榆耳和双孢蘑菇等。在分类学上大部分属真菌门中的担子菌纲，少部分分属于子 囊菌纲，子实体一般都比较大，与其它真菌相比，他们是属于最大型的，因此也称“大型真菌” 。 药用菌是指能治疗疾病、具有药用价值的一类真菌。即对人体有保健作用，对疾病有预防、抑制或治疗作用的真菌。 例如灵芝、猪苓等。其中有一些种类不仅具有医疗保健作用，还可以食用，被称为药食兼用真菌，如猴头、榆耳等，它 们广义上都称为药用真菌。2、为啥有些野生食用菌价格高却不能栽培？所有食用菌都不能直接利用太阳光能、二氧化碳和水合成碳水化合物。但是它们营养类型多、适应能力强，能够利 用不同有机物质，在特定环境中生长、繁衍。食用菌按照进化速度的快慢可以分为腐生菌、寄生菌和共生菌三种类型。 腐生菌是指从动植物尸体或无生命的有机物质中获取养料，以维持自身正常生活的一种营养方式的食用菌，腐生食用菌 较易培养，多数已能人工栽培，如平菇和香菇；寄生菌是一种生物生于另一种生物体内或体表，并从中摄取养料供生长 和繁殖的食用菌，寄生食用菌大部分可以栽培，也有一部分不能人工栽培，如冬虫夏草寄生在鳞翅目幼虫体上，它杀死 虫体，并将虫体变成长满菌丝的菌核形成冬虫夏草，蜜环菌、猴头、灵芝等寄生在树木上危害森林；共生菌是两种不同 生物或两种生物中的一种，由于不能独立生存而共同生活在一起，互利互惠，相互依存的食用菌，共生菌都不能人工栽 培，但是国内外正在进行半人工栽培技术研究，如热带菇类与白蚁或蚂蚁在自然条件下，鸡丛只能生长在白蚁窝上，白 蚁为鸡丛提供生存基质，鸡丛在白蚁窝内生长为白蚁提供食物一一菌丝体，白蚁和鸡丛间彼此依赖生存，还有不少食用 菌与高等植物发生共生关系，如美味牛肝菌、松口蘑、松乳菇和黑孢块菌等。所以有些野生食用菌价格高却不能人工栽 培是因为它们不是腐生食用菌。3、目前可以栽培的食用菌种类有哪些？我国是世界上对食用菌研究和记载最早的国家，对食用菌进行研究栽培有 2000 多年的历史。目前已经进行人工栽培 的食用菌种类有 200 多种，其中包括已经进行大规模栽培的香菇、滑菇、黄伞、平菇、红平菇、姬菇、凤尾菇、杏鲍菇、 白灵菇、黑木耳、金耳、银耳、榆耳、槐耳、冬虫夏草、蛹虫草、猪苓、茯苓、竹荪、猴头菇、灵芝、云芝、蜜环菌（榛 蘑） 、假蜜环菌、金针菇、巴西蘑菇、真姬菇、大球盖菇、灰树花、杨树菇、茶薪菇、金福菇、毛头鬼伞（鸡腿菇） 、双 孢蘑菇、四孢蘑菇、大肥菇、草菇、银丝草菇、大球盖菇、草地蘑菇、长根菇、虎奶菇、牛舌菌、桑黄、硫磺菌、绣球 菌、竹黄等。还有正在进行半人工栽培试验研究的松口蘑（松茸） 、羊肚菌、美味牛肝菌、块菌、铆钉菇等珍稀食用菌。4、腐生型食用菌有哪些？腐生食用菌又分为木生食用菌、土生食用菌、粪生食用菌和草生食用菌四种： （1）木生食用菌：指生长在枯木、倒木、树洞、树桩及断枝上的食用菌，如香菇、黑木耳、猴头菌、灵芝、平菇、金 针菇等； （2）土生食用菌：指生长在富含有机质的土壤中的食用菌，如橙盖伞、脆红菇、绿菇、春生鹅膏、块鳞灰毒伞、苦口 蘑、毒粉褶蕈、四孢蘑等； （3）粪生食用菌：指以腐熟动物粪便为营养源的腐生食用菌，如粪鬼伞、灰白粪鬼伞、双孢蘑菇、大肥菇等； （4）草生食用菌：指以禾草的茎叶为生长基质的食用菌类，如草菇、大球盖菇、草地蘑菇、凤尾菇等。5、哪些是木腐食用菌？木腐食用菌是指生于枯木或活立木的死亡部分，分解吸收其养分，破坏其结构，导致木材腐朽的食用菌。由于木腐 食用菌是从动植物尸体或无生命的有机物质中获取养料，所以木腐型食用菌较易培养，当前人工栽培食用菌中绝大多数， 例如香菇、杏鲍菇、白灵菇、黑木耳、金耳、银耳、榆耳、槐耳、平菇、金针菇等都是木腐型食用菌。6、木腐食用菌适合生料栽培吗？栽培木腐食用菌选用的培养基是以木质纤维素含量高的木屑等原料作主料，同时配以麦麸、米糠、蔗糖等营养丰富 而较速效的辅料，因而容易遭受生长迅速的各种竞争性杂菌侵染，进行生料栽培难度较大，但是也有极个别的食用菌， 如平菇采用生料栽培，但需要较洁净的原材料―玉米芯（菌源少） 、较少的麦麸（营养少） 、较多的石灰粉抑菌（pH 值高） 、 较低的发菌温度（低温发菌）才能栽培成功。所以木腐食用菌最好不进行生料栽培。7、哪些是草腐食用菌？1草腐食用菌是指生活在已死亡的农作物秸杆上，分解吸收其养分以维持生存，从而导致秸杆等草料腐烂的食用菌， 目前栽培草腐食用菌的种类较少，如双孢蘑菇、草菇、巴西蘑菇、鸡腿菇等草腐食用菌。8、草腐食用菌一般如何灭菌？草腐食用菌由于多数生活在已死亡的农作物秸杆上，所以大多采用发酵法灭菌，例如双孢蘑菇、草菇等，目前还有 采用熟料栽培的，也就是采用高压或常压灭菌，进行熟料栽培，如鸡腿菇、巴西蘑菇、灰树花等。9、什么是菌丝体？食用菌孢子（类似作物的种子）在适宜的环境条件下萌发形成细管状的丝状体，每根细丝叫菌丝。菌丝无色或有色 反复分枝，组成菌丝群，统称菌丝体。菌丝分为初生菌丝、次生菌丝和三生菌丝。 （1）初生菌丝：孢子萌发的菌丝称为初生菌丝，初生菌丝不能正常形成子实体； （2）次生菌丝：两条不同性别的初生菌丝配对后，进行质配发育成的双核菌丝称为次生菌丝，可以正常形成子实体； （3）三生菌丝：已经组织化的双核菌丝称为三生菌丝或结实性双核菌丝，三生菌丝可很快出菇（耳） 。10、什么是子实体？子实体由哪几部分组成？（1）子实体：由组织化的次生菌丝形成的具产孢结构的特化器官，称为子实体。它是食用菌在繁殖阶段形成的，伸展 到基质（木材、土壤等）上的部分。 （2）子实体组成：一般子实体有三部分组成：包括菌柄、菌盖和菌褶。菌柄是菌盖的支撑部分，下端与基质中的菌丝 体相连。少数食药用菌，如牛舌菌、侧耳等，当它们自树干的侧面长出时，往往无柄或菌柄不明显；菌盖又名菌帽，生 长在菌柄上，是人们食用的主要部分，也是食药用菌的主要繁殖器官，由菌肉和表皮两部分组成。食用菌菌褶（有的为 菌管如牛肝菌，有的为菌刺如猴头）位于菌盖的下方，是由菌盖内的菌肉菌丝向下生长而成。个别食用菌子实体还有菌 环、菌托等。11、食用菌生长发育分哪两个阶段？食用菌生长发育分为营养生长阶段（即菌丝生长期）和生殖生长阶段（出菇期） ： （1）营养生长阶段：一般来说，食用菌的生长是从孢子萌发开始的，用孢子进行繁殖是真菌的主要特点之一。在适宜 的外界条件下，孢子吸足水分，孢子壁膨胀软化（氧气容易渗入） ，孢子萌发，形成初生菌丝，不同性别初生菌丝配对后 进行质配，形成次生菌丝，即意味着营养生长的开始。 （2）生殖生长阶段：在培养基质内大量繁殖的营养菌丝，遇到光、低温等物理条件和搔菌之类的机械刺激，以及培养 基的生物化学变化等诱导，或者有适合出菇（耳）的环境条件时，菌丝即扭结成原基，进一步发育成菌蕾、分化发育成 子实体，并产生孢子。从原基形成到孢子的产生，这个发育过程称为生殖生长阶段，也叫子实体时期。 12、为什么说无性繁殖是食用菌繁殖的基本方式？ 无性繁殖是食用菌繁殖的基本方式，即不经过两个细胞的结合，由母体直接繁衍产生后代的繁殖方式。就像高等植 物插条繁殖一样，可以反复进行，并且产生后代的个体数量较多。在大多数食用菌中，无性繁殖可以通过无性孢子产生， 由它来完成生活史中的无性小循环；还可以从子实体上切取无性组织来进行培养繁殖，这种组织化的双核菌丝能可逆地 回到营养生长，即所谓组织分离培养，用这种方法获得的菌种，有助于保持稳定的遗传性状，在食用菌生产上广泛应用， 所以说无性繁殖是食用菌繁殖的基本方式。13、食用菌可利用的碳源主要是什么？碳源是食用菌最重要的营养来源，它不仅是食用菌合成菌体细胞的必不可少原料，而且是食用菌生命活动的能量来 源。在食用菌栽培中，除葡萄糖、蔗糖等糖类外，碳源主要来自各种富含淀粉、纤维素、半纤维素的植物性原料及农副 产品，如马铃薯、秸秆、杂木屑、玉米芯等。14、食用菌可利用的氮源主要是什么？氮源是食用菌合成蛋白质和核酸的重要原料。食用菌不能直接利用氮气，而蛋白质、氨基酸、尿素等有机氮化物是 食用菌最好的氮源，但蛋白质须经蛋白酶分解为氨基酸后方可利用，食用菌还可利用氨、铵盐、硝酸盐等无机氮化物， 氮源主要来自于米糠、麦麸、玉米面、豆粉等，而且碳源原料中也含有一少部分氮源。15、啥叫碳氮比？如何计算和确定碳氮比？（1）在食用菌栽培中，碳氮比（C/N）是指培养料中碳源与氮源含量的比值。在食用菌分解过程中，食用菌细胞碳氮 比是 8~12：1，在食用菌生长过程中 50％碳供给呼吸的能量，50％的碳组成食用菌细胞，所以培养基碳氮比是 16：1~24： 1，有足够的碳供给食用菌全部利用氮。不同食用菌及同一种食用菌的不同发育阶段所需的碳氮比有所不同。菌丝生长阶 段所需碳氮比以 20：1 左右为宜，出菇阶段以 30~40：1 为宜。也就是说，子实体生长发育期所需碳氮比高于营养生长期 的碳氮比。 2（2）在对一种长期使用的培养基配方中个别原料进行更换时，一般根据二者营养成分稍加调整即可。在试验一种新配 方并且要准确知道其碳氮比时，必须先进行计算，计算方法如下： 用稻草和豆饼各需配制碳氮比为 40：1 的培养料 100 千克，试问稻草和豆饼各需多少？ 查阅食用菌栽培书籍附表，得知稻草含碳量为 45.58％，含氮量为 0.63％；豆饼含碳量为 47.46％，含氮量为 7％。设 配制所规定碳氮比的培养料 100 千克需稻草 X 千克，则豆饼用量为（100－X）千克，根据 100 千克培养料中含碳量与含 氮量之比为 40：1，得下式： 0.4558X＋0.4746×（100－X）/0.0063X＋0.07×（100－X）＝40/1 解上式得稻草用量 X＝91.95 千克，豆饼用量＝100－X＝8.05 千克。16、为啥菌种生产不考虑碳氮比？在食用菌栽培中，我们需要获得高产的食用菌子实体，所以一定要考虑培养料的碳氮比，因为碳氮比过高或过低都 会影响产量。如果培养基碳氮比过高，如稻草碳氮比 80：1，在碳被食用菌全部利用前氮被全部消耗，分解速度减慢，原 来的食用菌细胞有一半死亡，这些菌体蛋白又供给分解作用所需的氮，造成出菇早、产量低。有些食用菌能生长在碳氮 比非常高的木材基物上，如变色多孔菌，可在树桩上形成子实体。食用菌在缺氮情况下，仅有的氮供给主要代谢过程， 如形成核酸和解聚酶。有些食用菌还能再利用衰死菌丝的氮，也就是在老化的菌丝体或子实体生长出新的菌丝体现象。 如果培养基碳氮比过低，如鲜草碳氮比 15：1，新鲜豆科植物碳氮比低于 10：1，超过食用菌所需要的氮，在分解过程中 大量的氮被其他生物利用，使食用菌不出菇或出菇延迟。 而菌种生产是要获得菌丝强壮的菌种，应该首先考虑水、气之间关系协调，菌丝生长速度快，菌丝强壮，杂菌污染 等方面的问题，其次再考虑培养基中养分的基本合理性，所以菌种生产不以培养基中的碳氮比为主。17、食用菌需要哪些无机盐？食用菌在生长发育过程中需要一定的无机盐营养。其中磷、钾、硫、钙、镁等元素需要量较多，称为大量元素，通 常靠加入适量的磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、硫酸钙（石膏粉） 、硫酸镁等无机盐来供给；而铁、钴、锰、锌、硼等元素需 要量甚微，称为微量元素，培养基中的水及添加的辅料中均含有一定量的微量元素，不必另行添加。18、食用菌需要哪些生长因子？食用菌在生长发育过程中需要一些维生素、核酸、生长激素等具有特殊生理作用的复杂有机物，这类被称为生长因 子的物质，虽然需要量少，如果缺乏会影响食用菌生长发育，如香菇菌丝不能合成维生素 B1，必须在培养基中添加。食 、核黄素（维生素 B2） 、生物素（维生素 H） 、吡哆醇（维生素 B6）等生长因子，在马 用菌所需要的硫胺素（维生素 B1） 铃薯、酵母膏、麦芽汁、麦麸、米糠等天然原料中含量比较丰富，因此，配制培养基时，不必另行添加。19、温度对菌丝体生长和子实体发育有啥影响？食用菌多为中温性菌类。它们的担孢子萌发及菌丝适宜生长温度一般为 20℃~30℃。食用菌孢子及菌丝体对温度、 特别是对高温反应不同，菌丝体（除草菇等少数耐高温菌类外）通常在 40℃就停止生长，甚至迅速死亡，而它们的担孢 子在 40℃或更高的温度下，能保持一定时间不丧失生活力。食用菌菌丝生长阶段及子实体分化发育阶段所需温度不同， 一般子实体分化发育适宜温度低于菌丝体生长适宜温度。20、食用菌温型是怎么划分的？有哪几种温型？（1）根据食用菌形成对环境温度要求可将食用菌分为恒温结实和变温结实两种类型。恒温结实性是指相同温度可形成 子实体原基，不需要温度变化的特性叫恒温结实性，如黑木耳、灵芝、猴头等。变温结实性是指相同温度不能形成子实 体原基，必须经过温度变化才能形成子实体原基的特性叫变温结实性，如香菇、金针菇、平菇等，变温结实的食用菌一 般采用低温处理，促进子实体原基分化。 （2）食用菌温型划分是根据食用菌原基分化对温度的要求划分的，一般分为低温型、中温型和高温型三种：低温型是 原基分化最高温度在 24℃以下，最适 20℃以下，这类食用菌大多数在秋末或春初发生，如香菇、金针菇、滑菇、双孢蘑 菇、平菇、猴头、羊肚菌等；中温型是原基分化最高温度在 28℃以下，最适 20℃~24℃之间，这类食用菌大多数在春秋 两季发生，如黑木耳、金顶侧耳（榆黄蘑） 、银耳、牛肝菌、大肥菇等；高温型是原基分化最高温度在 30℃以上，最适 24℃以上，这类食用菌大多数在盛夏或早秋发生，如凤尾菇、鲍鱼菇、草菇、灵芝、长根菇、白黄侧耳等。还可以细分 为中高温型和中低温型；同一种食用菌也可以划分为不同温型，如香菇、平菇等食用菌还可以分为高温型、中温型和低 温型等不同温型。21、水分和空气相对湿度对食用菌生长发育有啥影响？水分不仅是食用菌细胞的重要成分，而且养料的吸收及运输、代谢废料排泄等离开水都无法进行。因此，食用菌在 生长发育的各个阶段，都必须供给充足的水分。食用菌生长发育所需要的水分绝大多数来自培养料。培养料含有充足的 3水分，是菌丝体生长及子实体大量形成必不可少的因素。食用菌菌丝生长阶段，培养料的适宜含水量一般为 60％~65％， 子实体形成阶段需水量更大。培养料中的水分由于蒸发及子实体吸收而不断减少，因此，栽培时需经常喷水。此外，菇 房中如能经常保持一定的空气相对湿度，也能防止培养料中水分的过度蒸发。除培养料应有充足的水分，食用菌还需要 一定的空气相对湿度，适宜菌丝体生长的空气相对湿度，一般以 80％~95％较为适宜。当空气相对湿度低于 60％时，平 菇等食用菌的子实体停止生长；当空气相对湿度低于 45％时，子实体不再分化，已分化幼菇会干枯死亡。22、不同食用菌适宜 pH 值（酸碱度）范围不一样吗？多数食用菌喜欢微酸性的环境， 菌丝生长的 pH 值为 3~8， 最适 pH 值 5~6。 大部分食用菌当 pH 值大于 7 时生长受阻， 大于 8 时停止生长。由于培养料中 pH 值在灭菌后会降低 0.3~0.5，同时食用菌在新陈代谢过程中会产生某些有机酸，从 而使 pH 值进一步下降，因此，在配制培养料时，常将 pH 值略为调高。此外，为了使培养料的 pH 值维持在适宜的范围， 常在培养料中添加一定的缓冲剂。常用的缓冲剂有硫酸镁、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、硫酸钙（石膏粉）等无机盐，除 能供给磷、钾等矿物质营养外，还能对 pH 值的变化起缓冲作用。培养料中加入石灰即碳酸钙，可对培养料中的酸性起中 和作用。23、氧气和二氧化碳对食用菌生长发育有啥影响？氧气及二氧化碳也是影响食用菌生长发育的重要环境因素。大气中氧的含量约为 21％，二氧化碳的含量是 0.03％。 绝大多数食用菌都是好气性的，它们在生长发育过程中都需要较充足的氧气。当空气中氧气含量不足、二氧化碳浓度过 高时，对食用菌菌丝的生长，特别是子实体的发育，将产生不良影响。24、光线在食用菌生长发育过程中有什么作用？食用菌不含叶绿素，不像绿色植物那样，不能利用阳光进行光合作用将二氧化碳和水合成有机物。因此食用菌不需 要直射光，而需要一定的散射光。 （1）菌丝生长阶段：几乎所有食用菌菌丝都能在黑暗条件下正常生长，多数食用菌对光线反应不敏感，如黑木耳等。 光照也会抑制某些食用菌菌丝生长。散射光可以促进某些食用菌胞壁色素的转化和沉积，如香菇菌丝在明亮的条件下易 形成褐色菌膜；光照强度影响光敏感型食用菌菌丝生长速度，如灵芝。 （2）子实体生长发育阶段：光线对食用菌原基分化和子实体形成关系密切。适当光照是子实体形成的必要条件，但不 同种类食用菌对光照要求不同。光照还影响子实体色泽、菌柄长度和菌盖宽度的比例，如弱光平菇柄长、菌盖色浅、不 伸展，灵芝色泽淡、无光泽。但在金针菇栽培上，利用弱光培养柄长盖小的商品菇。光质对子实体形成影响正好与菌丝 相反。蓝光抑制菌丝，促进子实体分化，红光不能促进子实体形成，但促进菌丝生长。某些食用菌子实体还具有正向旋 光性，如灵芝菌盖生长点具有向光性，人为改变光源就形成畸形。 但是，近几年黑木耳全光栽培和香菇室外露地栽培的成功，也说明紫外线不仅能够杀伤食用菌，也能杀灭杂菌。总 之，光线对食用菌菌丝生长和子实体发育影响较大。25、什么是食用菌菌种？食用菌菌种是指在适宜基质上发育良好并已充分蔓延，具有结实能力，可用作食用菌生产的种源的菌丝体。食用菌 菌种又分为固体菌种和液体菌种两种，固体菌种又分为母种、原种和栽培种。26、优良品种是怎样获得的？自然选种也称为常规选种、常规育种。这也是获得优良品种简单而有效的方法。最初的食用菌菌种和品种都是通过 这一方法获得的。食用菌在自然界的生存和进化中，由于不同的环境条件，形成了不同的遗传性状，可以从中分离和筛 选出具有优良农艺性状的适合栽培的食用菌品种。目前使用的许多品种是从野生食用菌上分离、筛选、驯化和培育而来 的。野生食用菌和人工栽培的食用菌在生长发育过程中都会产生变异，从突变的个体中选育优良品种，也是自然选种的 一种方法。如白色双孢菇是从奶油色蘑菇突变个体中选育出来的，白色平菇是从灰色的糙皮侧耳突变个体中选育出来的， 黑灰色平菇低温品种是从灰白色美味侧耳突变个体中选育出来的。27、怎样进行组织分离？选择新鲜干净、农艺性状好的子实体，在无菌条件下用手或镊子将食用菌子实体掰开，再用灭菌的接种刀，在掰开 的断面中切一小块菌肉，迅速移到琼脂培养基上，放在适宜温度（26℃~28℃）下培养，就能从菌肉上长出新生菌丝体。28、如何进行基内菌丝分离？基内菌丝分离是利用生长食用菌菌丝的基质作为分离材料进行分离的一种方法。属于组织分离法中的一种。在食用 菌生产上主要是利用栽培袋（瓶） 、菌床培养料、段木等作为基内菌丝分离对象，如果是袋（瓶）的材料，多选用袋（瓶） 底部菌丝较幼嫩的部分进行分离。分离时取一块无污染的菌丝块，在无菌条件下，掰开菌丝块，从中挑取绿豆大小、菌 丝生长旺盛的菌丝块，移入试管即可。如果是菌床宜选择内部无污染的菌丝块。 429、用手掰开和用刀切开所得的菇体有区别吗？用手掰方法获得的菇体，断面不接触任何有菌的地方，是最纯正的，被破坏也最少，切下的小块在原断面处也最容 易长出菌丝，成活率高，污染率低；用无菌小刀或刀片切开，一则刀片经过菇体表面，该表面即使经过消毒，往往也会 带有少量杂菌，易将残留在表面的杂菌，通过刀片污染切面，从切面上分离出来的组织，污染率高。二则有些食用菌子 实体组织用刀切容易，而有些食用菌子实体组织似海棉状，不易切下，而且对切面组织破坏严重。30、菇类组织分离应选哪一部位？伞菌类食用菌子实体组织分离要选择幼嫩组织，具体做法如下： （1）有菌膜的食用菌如双孢菇和草菇，要选择未破膜的幼小菇蕾，具体大小以分离操作方便而灵活掌握，分离时取其 尚无孢子的幼嫩菌褶肉为分离材料。 （2）无菌膜的较大型子实体，要选用幼小的子实体，可取其菌盖与菌柄交界处菌肉为分离材料。 （3）若只采到成熟的较大型子实体，可取其菌盖外缘菌褶上方的菌肉为分离材料。 （4）朵型较小的子实体，如金针菇，可取其菌柄与菌盖交接处细胞活跃的形成层，具体方法是在无菌环境里一手握住 菌柄，另一手中指和食指分开，沿菌柄迅速打掉菌盖，即在菌柄顶端露出半球形的交界面，用锋利的接种钩取其中一小 块即可。31、耳类组织分离有几种方法？耳类食用菌子实体呈胶质、薄片状，分离比伞菌类困难，一般分离方法有三种： （1）将成熟的、典型的耳片取回，用清水洗净，再用无菌水冲洗数次。将处理好的耳片放在无菌培养皿中，用消毒刀 片将耳片切成 0.5 平方厘米小块，迅速移入试管培养基中，放在适宜温度（26℃~28℃）下培养即可，此法易污染杂菌。 （2）选择较厚的、完整的耳片，连同基部一起慢慢切下带回，雨天采耳应风干 3 ~5 小时。操作时将耳片撕开，最好 撕至基部肥厚处，轻轻用手挤压，使破开面扩大，但不能全断开，再用灭菌的、锋利刀片在破开面中切出 1/3~1/4 火柴头 大小的一小块内部组织，用接种钩移入试管培养基中，置适宜温度（26℃~28℃）下培养即可。 （3）选取尚未展开耳片的耳基组织，用不开袋（瓶）的方法获得无菌原基，从中挑出一小块组织分离即可。32、什么是品种？什么是菌种？（1）品种是指经各种方法分离、诱变、杂交或细胞融合而选育出来的，生产上具有特异性、均一性和稳定性的菌株或 成品系。 （2）菌种是指经人工培养并可供进一步有性繁殖或栽培使用的菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种又分为固体 菌种和液体菌种两种，而固体菌种又分母种、原种和栽培种，目前固体菌种在我国已经得到普遍应用。33、什么是食用菌固体菌种？生长在固体培养基上的食用菌菌种称为固体菌种，目前我国食用菌生产上使用的各级商品菌种都是固体菌种，如以 试管作为容器的斜面母种，以菌种瓶（袋）为容器的原种和栽培种。固体菌种的母种大多采用 PDA 试管培养基固体菌种 的原种和栽培种大多采用木屑培养基，也有采用其它类型的固体菌种的。34、食用菌固体菌种有几种类型？食用菌固体菌种主要有以下几种类型：木屑种（常规生产用种） 、粪草种（草腐食用菌菌种） 、谷粒种（从国外引进 的技术和生产菌种方法） 、木块种（常用于黑木耳和香菇栽培用种）和颗粒种（从国外引进技术和颗粒菌种生产线进行菌 种生产） ，这几种菌种类型都有各自的优缺点。35、食用菌菌种可分为几级？我国食用菌菌种分为母种（也叫一级种） 、原种（也叫二级种）和栽培种（也叫三级种）三级。一般采用母种生产原 种，采用原种生产栽培种，栽培种再用于食用菌栽培，也有用原种直接栽培食用菌的，如代料地栽黑木耳。36、什么是谷粒菌种？谷粒菌种是指用小麦、玉米、高粱和谷子等作物籽粒作培基生产的食用菌菌种。谷粒菌种具有菌丝生长健壮、生活 力强、发菌快，在基质中扩展迅速等优点。国外欧、美等国的双孢菇生产中使用的几乎全是谷粒菌种。国内山东九发集 团在双孢菇生产中首先使用谷粒菌种，国内一些食用菌菌种生产企业和食用菌栽培户也开始选择谷粒菌种，它的优点是 菌丝生长快，缩短发菌时间，菌丝强壮；缺点是鼠害发生严重。37、什么是枝条菌种？枝条菌种是采用木筷子或枝条作为培养基而生产的食用菌菌种，枝条菌种在香菇和黑木耳等食用菌栽培上应用，它 的优点是菌种在接种时不受伤害，菌丝萌发快，污染率低；缺点是菌种生产技术要求高，菌种培养期长。38、什么是颗粒菌种？5颗粒菌种是用木屑、秸秆、堆肥等适宜材料采用人工压制成颗粒型基质后生产的菌种，国外叫种木粒。颗粒菌种的 生产工艺日益完善，目前中国台湾以及浙江庆元已经从国外引进颗粒菌种生产线进行香菇代料袋栽菌种生产，国外日本 和韩国已经进行生产应用，虽然颗粒菌种在国内尚未形成主流种型，但有广阔的发展前景。39、什么是菌种钉？菌种钉是指用圆形、楔形等小木块为培养基制作的食用菌菌种，也叫木块菌种。这种种型的菌种通常仅用于香菇、 黑木耳等木腐食用菌段木栽培。不过，近年在少数地区的香菇代料袋栽中也有应用。40、什么是母种？食用菌母种是经各种方法选育得到的，具有结实性的菌丝体纯培养物及其继代培养物，以玻璃试管为培养容器和使 用单位，也称一级种、斜面种或试管种，母种又分为保藏母种、扩繁母种和生产母种等。 41、什么是原种？ 原种是用母种在木屑、粪草等天然固体培养基上扩大繁殖而成的菌丝体纯培养物，称为原种，也叫二级种。原种常 以透明的玻璃瓶或塑料菌种瓶或 14×28 厘米聚丙烯塑料袋为培养容器和使用单位， 原种用来繁育栽培种或直接用于栽培。42、什么是栽培种？栽培种是用原种在天然固体培养基上扩大繁殖而成的，直接作为栽培基质种源的菌种称为栽培种，也叫三级种。栽 培种常以透明的玻璃瓶、塑料瓶或塑料袋为培养容器和使用单位。栽培种只能用于栽培，不可再次扩大繁殖成菌种。43、什么是二级菌种繁育体系？二级菌种繁育体系就是不经过原种生产过程，采用母种直接生产栽培种，栽培种直接用于食用菌生产的菌种繁育体 系。我国食用菌菌种繁育体系包括二级菌种繁育体系和三级菌种繁育体系两种，但是主要以三级菌种繁育体系为主，个 别食用菌种类采用二级菌种繁育体系，如我国黑木耳代料地栽就是采用二级菌种繁育体系生产黑木耳的；而日本菌种生 产都是采用二级菌种繁育体系，即母种生产栽培种。44、什么是三级菌种繁育体系？三级菌种繁育体系就是采用母种生产原种，采用原种生产栽培种，栽培种再用于食用菌生产的菌种繁育体系。我国 食用菌菌种生产大多采用三级繁育体系，即母种（也叫一级种） 、原种（也叫二级种）和栽培种（也叫三级种） ，但是黑 木耳除外。45、可以用三级种繁育四级种吗？由于食用菌菌种在转代过程中都会受到内在条件和外在条件的影响，内在条件是菌种本身的变异，外在条件包括培 养基、培养条件、接种技术等，这些因素对食用菌菌种活性、纯度、强弱等造成影响，使菌种质量下降；转代培养次数 越多，这个菌种培养物细胞群体的均一性越差、异质性越高，生理活性变低的可能性也越大，退化因子积累也越多，出 现退化几率也越高，出现退化越早；再加上国家食用菌菌种管理办法中明确规定：我国食用菌菌种生产采用三级菌种繁 育体系，即母种、原种和栽培种。所以栽培种只能用于食用菌生产，不可再次扩大繁殖。 46、什么是食用菌液体菌种？ 将固体母种接入装有液体培养基的特定容器里，并给予必要的生长条件，通过振荡、搅拌或气流旋涡等方式，使之 迅速繁殖而产生菌丝球，称为液体菌种。液体菌种由于缺乏质量检验技术和方法，且技术要求高、生产难度大、成本高 以及技术不成熟等原因，尚未大面积推广应用，只是在平菇、黑木耳、灵芝、金针菇、香菇等品种上小面积试验，目前 大多数食用菌加工企业和药厂应用发酵菌丝体提取有效成分，而不是用于栽培食用菌。47、液体菌种生产工艺流程如何？液体菌种生产工艺如下： 24℃~25℃ 24℃~25℃ 24℃~25℃ 24℃~26℃斜面固体菌种――→一级种――→二级种――→三级发酵――→用于扩大培养或栽培袋。 5~7 天 5~7 天 5~6 天 4天母种生产采用 20×200 毫米规格试管，配方根据栽培不同食用菌（木、草腐性食用菌）来具体确定，接种量一般每 只母种可以扩接 30 只左右，然后恒温 24℃~26℃培养 7~15 天，长满试管斜面后取出备用。48、不同食用菌菌种进行液体发酵配方一样吗？不同食用菌种类的液体菌种发酵种配方不同： （1）平菇配方：马铃薯 100 克，红糖 15 克，葡萄糖 10 克，麦麸 30 克，蛋白胨 1.5 克，磷酸二氢钾 1.5 克，硫酸镁 0.75 克，维生素 B11 片，聚氧丙稀甘油 0.3 毫升，pH 值自然； 6（2）金针菇配方：马铃薯 100 克，红糖 15 克，葡萄糖 10 克，麦麸 40 克，蛋白胨 2.0 克，磷酸二氢钾 2.0 克，硫酸镁 1.0 克，维生素 B11 片，聚氧丙稀甘油 0.3 毫升，pH 值自然； （3）白灵菇配方：马铃薯 100 克，红糖 15 克，葡萄糖 10 克，麦麸 40 克，蛋白胨 2.0 克，磷酸二氢钾 2.0 克，硫酸镁 1.0 克，维生素 B11 片，聚氧丙稀甘油 0.3 毫升，pH 值自然； （4）香菇配方：马铃薯 100 克，红糖 15 克，葡萄糖 10 克，麦麸 40 克，蛋白胨 2.0 克，磷酸二氢钾 2.0 克，硫酸镁 1.0 克，维生素 B11 片，聚氧丙稀甘油 0.3 毫升，pH 值自然； （5）杏鲍菇配方：马铃薯 100 克，红糖 15 克，葡萄糖 10 克，麦麸 40 克，蛋白胨 2.0 克，磷酸二氢钾 2.0 克，硫酸镁 1.0 克，维生素 B11 片，聚氧丙稀甘油 0.3 毫升，pH 值自然； （6）榆黄蘑配方：马铃薯 100 克，红糖 12 克，葡萄糖 10 克，麦麸 40 克，蛋白胨 2.0 克，磷酸二氢钾 1.5 克，硫酸镁 0.75 克，维生素 B11 片，聚氧丙稀甘油 0.3 毫升，pH 值自然； （7）茶新菇配方：马铃薯 100 克，红糖 15 克，葡萄糖 10 克，麦麸 50 克，蛋白胨 2.5 克，磷酸二氢钾 2.0 克，硫酸镁 1.0 克，维生素 B11 片，聚氧丙稀甘油 0.3 毫升，pH 值自然； （8）鲍鱼菇配方：马铃薯 100 克，红糖 15 克，葡萄糖 10 克，麦麸 40 克，蛋白胨 2.0 克，磷酸二氢钾 2.0 克，硫酸镁 1.0 克，维生素 B11 片，聚氧丙稀甘油 0.3 毫升，pH 值自然； （9）鸡腿菇配方：马铃薯 100 克，红糖 12 克，葡萄糖 12 克，麦麸 40 克，蛋白胨 2.0 克，磷酸二氢钾 2.0 克，硫酸镁 1.0 克，维生素 B11 片，聚氧丙稀甘油 0.3 毫升，pH 值自然； （10）灵芝配方：马铃薯 100 克，红糖 12 克，葡萄糖 12 克，麦麸 40 克，蛋白胨 2.0 克，磷酸二氢钾 2.0 克，硫酸镁 1.0，维生素 B11 片，聚氧丙稀甘油 0.3 毫升，pH 值自然； （11）黑木耳配方：马铃薯 100 克，红糖 15 克，葡萄糖 10 克，麦麸 40 克，蛋白胨 2.0 克，磷酸二氢钾 2.0 克，硫酸 镁 1.0 克，维生素 B11 片，聚氧丙稀甘油 0.3 毫升，pH 值自然； （12）猴头菇配方：马铃薯 100 克，红糖 15 克，葡萄糖 10 克，麦麸 45 克，蛋白胨 2.5 克，磷酸二氢钾 2.0 克，硫酸 镁 1.0 克，维生素 B11 片，聚氧丙稀甘油 0.3 毫升，pH 值自然； （13）滑菇配方：马铃薯 100 克，红糖 15 克，葡萄糖 12 克，麦麸 50 克，蛋白胨 2.5 克，磷酸二氢钾 2.0 克，硫酸镁 1.0 克，维生素 B11 片，聚氧丙稀甘油 0.3 毫升，pH 值自然； （14）双孢菇配方：马铃薯 100 克，红糖 15 克，葡萄糖 10 克，麦麸 50 克，蛋白胨 2.0 克，酵母膏 1.0 克，磷酸二氢 钾 2.0 克，硫酸镁 1.0 克，维生素 B11 片，聚氧丙稀甘油 0.3 毫升，pH 值自然； （15）灰树花配方：马铃薯 100 克，红糖 15 克，葡萄糖 15 克，麦麸 45 克，蛋白胨 3.0 克，磷酸二氢钾 2.0 克，硫酸 镁 1.0 克，维生素 B11 片，聚氧丙稀甘油 0.3 毫升，pH 值自然； （16）姬松茸配方：马铃薯 100 克，红糖 13 克，葡萄糖 13 克，麦麸 50 克，蛋白胨 1.0 克，酵母膏 1.5 克，磷酸二氢 钾 2.0 克，硫酸镁 1.0 克，维生素 B11 片，聚氧丙稀甘油 0.3 毫升，pH 值自然。49、食用菌液体菌种生产对配方原料有要求吗？液体菌种生产对原材料要求特别严格，如果在培养基配制过程中发现其颜色不正常（如发黑、灰色等）或有较大絮 状物出现时，则该培养基不能进罐，应检查当地水质是否重金属盐超标或是否有其他有害物质。 马铃薯应新鲜无霉烂、不生芽、不变绿；葡萄糖选用食用红糖即可，不能用白糖代替也可以用工业葡萄糖，不得选 用口服葡萄糖或多微葡萄糖；麦麸选用新鲜无霉变、无辣味、不结块的大片麦麸，如麦麸过细，用 15~20 目筛子过筛， 取筛上大片麦麸；蛋白胨应选用以精蛋白为基质的、经水解后获得的干燥粉末，总氮含量大于或等于 10％，氨基酸含量 大于或等于 2.5％；酵母膏要求含氮量大于 7％，氯化物小于 5％；磷酸二氢钾、硫酸美、硫酸铵选用瓶装试剂，分析纯 或化学纯均可；维生素 B1 为口服制剂，要求含量 10 毫克/片，不挂糖衣素片。50、生产液体菌种应注意哪些方面？生产液体菌种应该注意培养条件和菌种检测 2 个方面： （1）培养条件：斜面培养是将新接斜面菌种于 24℃~25℃下培养，5~6 天菌丝长满斜面，如不马上使用可保存 4℃冰 箱中备用；②种子培养：一级种子培养（摇瓶）是将新鲜斜面母种接种于 500 毫升三角瓶盛 100 毫升的种子培养基，放 置在 180 转/分钟的旋转摇床上，24℃~25℃下培养 2~3 天，菌液变稠取下，经检查未污染杂菌可供使用；二级种子培养 （摇瓶）是用 5000 毫升大三角瓶，盛 1000 毫升种子培养基，接 1 瓶一级种，置 90 转/分钟旋转摇床培养 2 天即可；种 子罐种子扩大培养接种量 5％~10％，温度 24℃~26℃，搅拌速度 150~ 180 转/分钟，通气量每分钟为 1：0.5（V/V） ，罐 压 0.3 千克，培养 2~3 天，待无菌检查未污染杂菌接入二级种子罐或发酵罐；③发酵培养：接种量 5％~10％，温度 24℃~26℃，搅拌速度为 150~180 转/分钟，通气量每分钟为 1：0.5（V/V） ，培养 5 ~6 天。 7（2）菌种检测，包括纯度检查、活力检查和酸度检测：①纯度检查：无菌实验检查阴性，可采用显微镜观察和霉菌、 细菌常规培养试验方法；②活力检查：外观菌丝浓稠并有香味，以菌丝体发酵液能够静止 5 秒钟而无菌丝下降现象为活 力强的判断。同时通过显微镜观察菌丝粗细、分枝等情况；③酸度检测：用酸度计测定 pH 值 4~5。51、生产菌种用的培养基有几种？食用菌生产用培养基有固体培养基和液体培养基两种： （1）液体培养基：将营养成分加适量水配制的培养基，液体培养基多用于液体菌种生产； （2）固体培养基：在液体培养基中加琼脂等凝固剂或直接用木屑等天然固体基质制成的培养基，固体培养基多用于固 体菌种生产。52、怎样简单鉴别食用菌品种质量？优良食用菌品种应具有均一性，这种均一性具备了才能进行其他形态特征特性的鉴别，简单鉴别品种质量主要从以 下 4 方面进行： （1）长相均一性。任何一个品种都有其特有的形态特征。如在普通 PDA 培养基上，香菇 Cr-04 菌丝均匀致密，气生 菌丝少而稀疏，香菇 241-4 菌丝则较稀疏。再如平菇 CCEF-89 在普通 PDA 培养基上菌丝平铺于培养基表面生长，无气生 菌丝。如果在继代（转管）培养中出现个别或部分培养物长势有变化，则这一批菌种都不可使用。 （2）长速均一性。优良品种进行继代培养时长速均一，若培养期间出现个体间长速不一，参差不齐，则不能使用。 （3）外观均一性。对一支试管斜面母种进行观察，菌丝以接种点为中心向周围均匀辐射生长，形态和长速均匀连贯， 边缘整齐则为优良品种。 （4）菌丝洁白、粗壮、浓密，细胞生命力强是优良品种的重要标志。否则表明该品种已老化，不能使用。 这只是基本的、初步的，品种质量还要以出菇结果为标准进行检验和鉴别。53、如何鉴定食用菌母种质量？食用菌母种是菌种生产过程的原始种源，母种质量对食用菌菌种生产至关重要，母种质量主要从 3 方面进行鉴别： （1）母种纯正，即不允许有任何其他微生物存在。一般来说，在光滑半透明琼脂斜面培养基上，很容易识别粘滑的细 菌菌落、粘稠的酵母菌菌落和产生各种颜色孢子的霉菌菌落； （2）母种要典型，即具备某一菌种应有的典型特征； （3）母种要健壮，即菌种长势良好，生长速度正常。根据肉眼观察满管时间，对母种长势和活力作出正确判断。54、如何鉴别食用菌原种和栽培种质量？食用菌原种和栽培种的质量主要从以下 3 方面进行鉴别： （1）凡菌种瓶（袋）中已生长的菌丝逐渐消失，出现被吞噬的斑块或直接发现有螨类活动，表明菌种已遭受螨类污染； 凡菌种瓶（袋）中出现红、黄、黑、绿等各色杂菌孢子，瓶（袋）壁出现两种或两种以上明显不同菌丝的大大小小分割 区，分割区之间有明显拮抗线，瓶（袋）中散发出各种酸败、发臭等异味，都遭受了霉菌或细菌、酵母菌等杂菌侵染， 应予以淘汰，并及时进行深埋或焚烧。 （2）凡菌种瓶（袋）表面出现过厚的、致密坚韧的菌皮，菌柱萎缩、脱壁，菌丝出现自溶现象，菌种瓶（袋）底部有 大量黄褐色液体沉积，菌种瓶（袋）表面及四周出现过多原基或耳芽，说明菌种老化或退化，不宜使用。 （3）严格剔除上述两类不合格菌种后，符合该种食用菌的基本特征，且菌丝穿透菌种瓶（袋）底部，菌丝生长均匀一 致，且有弹性，原种瓶（袋）内有母种块，栽培种瓶（袋）内有原种块，即为合格菌种。55、怎样选购食用菌菌种？购买食用菌菌种时，除了选择信誉好的大专院校、科研单位或正规食用菌菌种生产厂家作为选购对象外，对现场购 买或成批发送的菌种要进行仔细挑选，并要考虑以下 4 个方面： （1）购买菌种前要多了解，一定要名副其实。每一种食用菌都有一个中文名称，中文名是根据拉丁学名翻译而来，或 沿用古代称谓，或根据食用菌特点而定，因此在购买菌种时，特别是栽培历史短、还没普及的新食用菌时，一定要勤查 多问，以免所购菌种名不符实，造成损失，如冬菇就是金针菇和香菇的别称。 （2）菌种温型与当地气候条件相吻合。从外地引种应注意南、北方气候条件差异。南北方引种原则一般遵循： “应北 菇南移，不应南菇北移；应从纬度相差不太大的地区引种” 。我国幅员辽阔，南、北方气候差异大，特别是对积温敏感的 品种，从外地引种新品种，必须在当地做 10000 袋以上的出菇试种，才可将该品种用于大面积生产。将晚熟品种引到北 方栽培，或将早熟品种引种到南方地区推广应用，都可能造成重大损失。 （3）菌种种性与栽培方式相吻合。目前香菇、黑木耳和银耳等木腐食用菌大多采用代料栽培，同时还保留着一定规模 段木栽培。由于两种栽培方式在培养基和环境条件差别大，因此，在购买以上食用菌菌种时，应选购与栽培方式相应的 8品种。 （4）菌种相关特性与期望性状相吻合。金针菇白色菌柄受市场欢迎，选用白色金针菇品种效果好；香菇菌盖上产生白 色花纹称“花菇” “花菇”市场价格高于普通香菇，白色花纹产生虽然受环境因素影响大，但选用低温或中温且菌盖 ， 厚的菌种有提高花菇形成率。56、栽培食用菌引种应注意哪些问题？目前，我国食用菌菌种管理的法律和法规还不完善，假冒伪劣菌种给栽培户造成重大损失的事件时有发生，所以引 种对于菌种生产厂家和栽培户非常重要。如品种或菌种均一度不够、品种老化、退化、性状不清或有误等。引种时要特 别注意以下几个方面： （1）直接从育种单位和专业菌种保藏机构引进品种。如金针菇品种杂交 19 是由福建省三明真菌研究所选育的，要引 进这一品种就要到福建省三明真菌研究所和菌种保藏机构购买。目前食用菌菌种广告铺天盖地，有的称平菇某品种生物 学效率达 500％~600％， 而平菇实际产量 100％~150％。 广告中所谓新品种绝大多数是原来科研单位选育品种的同物异名， 有的甚至是自行分离未经选种的分离物。 （2）详细了解品种生物学特性和生产性状。一个食用菌种类有很多品种，不同品种生物学特性和生产性状不同，适宜 栽培环境条件不同，对极限条件耐受性不同，适宜栽培季节也不同。引种时应了解：①子实体品质，如菌盖色泽、薄厚、 大小，菌柄长短、粗细、色泽，菇体组织紧密度和质地等；②培养料配方，选用任何品种都应有最适培养料配方；③适 宜发菌和出菇温度，包括可忍耐最低温度、最高温度、适宜温度范围和最适温度；④抗逆性强和抗杂性。抗逆性强的品 种管理粗放，易于栽培成功和获得产量。⑤对环境条件特殊要求，如基质含水量和 pH、通气和光线等，如香菇 1363 需 要浸水出菇等；⑥耐贮运特性，多种食用菌产品以鲜销为主，而且需要运输；⑦其它生产特性，如发菌期和整个生产周 期的长短，菇潮集中还是分散等。 （3）先试种后推广。不论选择哪一品种，在没有栽培经验情况下，要先试种后扩大，以免造成不应有的损失。在试种 阶段，最好引进 2~4 个品种，通过试种选出适合当地栽培环境设施特点和管理水平及市场要求的品种。 （4）2 个以上品种搭配使用。同一种食用菌有不同出菇温度的品种类型，它们适合不同气候条件的地区和不同季节栽 培。在我国多数地区，平菇周年播种、周年栽培。而我国多数地区四季分明，栽培户应根据不同栽培季节选用不同温型 的品种，如春季出菇应选择中高温品种，秋季出菇应选择中低温品种，夏季应选择耐高温品种，冬季应选择低温、耐二 氧化碳品种。57、如何选择栽培食用菌的种类？目前可人工栽培的食用菌种类有 100 多种，大规模商业化生产的有十几种，较少量生产的珍稀食用菌种类也有十几 种。要根据市场需求和生产条件来选择适宜栽培的食用菌种类： （1）进行市场调查。生产出的食用菌产品只有符合市场需要，才能获得更大的经济效益。不同栽培规模、不同生产模 式、不同市场定位的市场调查主要当地及国内外的市场调查。如当地市场销售食用菌种类、数量、产品形式(干品、鲜品、 盐渍品、罐藏品等)、市场价格(出厂价、批发价、零售价)，现有市售食用菌资源等，通过调查分析，对市场容量做出判 断。如果栽培地距人口密集大中城市较远，运输不便，产品需要完全就地鲜销或干制销售。 （2）进行生产条件调查。生产任何一种食用菌都需要一定生产条件，不同种类之间有一定的差异。除了固定房屋场地 和设施外，生产条件有三方面，即原材料、气象条件区位优势和交通状况。栽培用的培养料要尽量就地取材，既可保证 质量，又降低生产成本。如双孢菇使用的培养料是麦秸、稻草和牛粪等，如果在没有这些原料的林区栽培，从远方运输 材料会提高生产成本。当地气象条件是否适宜种植该种食用菌是选择栽培种类的关键，因为气象条件不具备，会造成不 出菇、出菇产量低、质量差、病害发生严重等现象。在距大中城市较近的地区栽培食用菌，可以选择鲜销的食用菌种类， 如香菇、平菇、金针菇、草菇等。而距大中城市较远的偏僻乡村或山区，应选择干制食用菌种类和品种，如香菇和黑木 耳。在签订收购合同前提下，适于制罐或其他简单加工的食用菌也可栽培，如双孢菇、平菇、金针菇和滑菇等。58、如何选择栽培品种？在确定栽培食用菌种类后，就应根据当地资源状况和市场需求确定栽培品种，选择食用菌栽培品种应根据以下 3 个 方面因素综合考虑： （1）根据市场需求选择。市场需求是品种选择的首要因素，市场需求主要在于子实体品质，如色泽、大小、风味、质 地等。如长春市场的平菇，灰色、乳白色或白色柄短、质地致密、口感嫩滑的品种受欢迎，而棕褐色或蓝黑色、质地疏 松的品种就很难卖出。 9（2）根据栽培条件和季节选择。不同栽培设施环境条件不同，如山洞比园艺设施温度稳定，高棚不及低棚温度稳定。 又如，使用不同的培养料出菇期的长短不同，如加入一定量玉米芯粉以木屑为主料栽培香菇时，出菇期比完全以木屑为 主料的要短，以玉米芯、稻草、麦秸、木屑为主料栽培的平菇出菇期比以棉籽壳为主料的要短。不同季节播种，适宜出 菇季节长短也不同。如以棉籽壳为主料栽培平菇适期播种时，要在满足市场需求品质的前提下尽量选择后劲长、菇潮多 的品种。当自然条件适宜出菇期短，使用稻草、玉米芯等为主料栽培的情况下，要选择出菇早、头潮菇产量高、转潮快 的平菇品种。品种选择要尽量使品种生长所环境条件与栽培设施条件和季节内的自然气候特点相吻合。 （3）根据综合农艺性状选择。要综合考虑品种农艺性状，如出菇温度、菇潮分布、抗逆性和抗杂性、产量潜能等，选 择深受消费者欢迎，适合自己栽培条件的优良农艺性状的食用菌品种。59、食用菌“品种”和“菌种”有区别吗？从严格意义上讲，食用菌“品种”和 “菌种”含义不同。 “品种”一词是从作物育种学上借用来的术语，实际上在食用菌中相当于作物品种这一术语的是“菌株”“ 菌株” 。 是从自然界或诱变处理后的培养物中分离的纯品系。从“品种”或“菌株”的意义上讲，其属性特征是区别性、均一性 和稳定性。这三个属性缺一不可，其各农艺性状，如丰产性、抗病性、抗逆性、品质等表现从个体空间上要均一，即均 一性；时间上要稳定，即稳定性。只有符合这些条件的菌种才能称为“品种”或“菌株” 。 而“菌种”有广义和狭义两种含义，广义上有“品种”之意，如我们常说的某个菌种好或不好，就是指这个“菌种” 的品种特性好或不好，而不是某一个菌种的好坏；狭义上是指菌种个体，如一支斜面母种、一瓶原种或栽培种，狭义的 菌种好坏是指菌种个体的生命状态及可以鉴别好坏的外观质量，如长势、形态、菌龄等，而不是这些菌种所属品种的遗 传学性状的好坏。如果借用作物栽培学术语，狭义食用菌“菌种”相当于农作物种子，而不是品种。60、自己分离的食用菌菌种可以称为品种吗？能出售吗？我国《食用菌菌种管理办法》第二条明确规定： “在中华人民共和国境内从事食用菌品种选育和菌种生产、经营、使 用、管理等活动，应当遵守本办法。，第二十一条规定： ” “禁止无证或者未按许可证的规定生产经营菌种。 ”所以自己分 离的食用菌菌种不能称为品种，也不能出售，如果私自出售则按照假菌种进行处罚和赔偿。61、啥是食用菌菌种退化？菌种退化原因是啥？（1）食用菌菌种退化是指菌种在生长发育过程中发生变异或生长状况下降，丧失原来的特征，而在菌种生长阶段表现 异常。如母种菌落形态不正常、菌丝倒伏、生长势变弱、长速变慢、个体间长速和长相不均一、产生色素等。如果培养 期间出现色素，表明品种退化严重。如黑木耳和香菇在母种培养期间出现明显色素，均不能形成子实体。 （2）菌种退化原因：①菌种混杂：在菌种继代培养过程中，不同菌株之间由于人为失误而混杂，导致不同菌株的菌丝 体生长在一起，菌丝发生变异，原有菌株性状改变，常常表现产量下降、质量变劣等；②发生有害突变：一个正常菌株 经过多代移植也不会导致遗传性状改变。但是如果一个菌株菌丝细胞中发生有害突变，而且突变体能适应外界环境条件。 随着移接次数的增加，有害突变体菌丝细胞群所占比例逐渐增大，该菌株生产性能会随之恶化，退化现象逐渐显现；③ 杂交菌株双亲核比例失调：杂交菌株菌丝体在转管过程中，受到外界环境、营养条件等改变的影响，其中一个亲本核发 育正常，且逐渐占据优势，而另一亲本核可能不适应而逐渐减弱，导致双核比例失调，随着转管次数增加，核比例失调 逐渐扩大，最终导致在栽培中表现退化；④感染病毒：菌种感染病毒后，病毒随菌丝体扩大繁殖而增加，并且通过带毒 孢子传给下一代，当菌种携带一定浓度的病毒粒子，在栽培中会表现减产，品质下降等退化现象。62、如何预防食用菌菌种退化？预防食用菌菌种退化主要从以下 5 方面入手，预防菌种退化： （1）防止菌种混杂：在菌种转管、出菇试验等工作中，加强“品种”隔离，减少“品种”间混杂，保证优良品种遗传 组成在较长时间内保持稳定。 （2）控制菌种传代次数：菌种转代次数越多，产生变异机率越高，菌种发生退化概率越的，生产中应严格控制菌种转 代次数。 （3）采用有效菌种保藏方法保存菌种：菌种保存应短期、中期和长期相结合，根据不同食用菌种类的要求应用不同保 藏方法进行扩繁，确保菌种长期保持原有优良性状。 （4）创造菌种生长良好的营养条件和环境条件：母种培养基营养条件适宜，菌种生长才能健壮，才能减少退化现象发 生。营养不足和过剩对菌种生长均不利。菌种生长繁殖受物理、化学、生物等外界条件影响，如条件适宜，菌种生长正 常，不易退化；不适宜会引起菌种退化。 （5）对菌种可能遭受病毒感染保持高度警惕：对有疑问的菌种要及时检验，鉴定已感染的病毒，尤其是病毒粒子含量 10高，菌丝体及子实体性状已受到严重影响的菌种，应及时淘汰。63、如何进行食用菌菌种复壮？进行菌种复壮主要采取以下 3 种方法： （1）进行菌丝尖端分离：在显微镜下应用显微操作器把菌丝尖端切下，转接到 PDA 培养基上培养，这样可以保证该 菌种纯度，并且起到脱病毒作用，使菌种保持原有菌株遗传物质，恢复原来的生活力和优良种性，达到复壮目的。 （2）适当更换培养基：长期在同一培养基上继代培养的菌种，生活力逐渐下降。将碳源、氮源、碳氮比、维生素、矿 物质营养作适当调整，对因营养基质不适而衰退的菌种有一定的复壮作用。 （3）进行菌种分离，无性繁殖和有性繁殖交替使用：长期进行无性繁殖，菌种会逐渐衰退，而经有性繁殖所产生的孢 子，具有丰富遗传特性，因此，定期进行食用菌的单孢分离，从中选出具有该品种优良性状的新菌株代替旧菌株，达到 复壮目的。64、啥是食用菌菌种老化？食用菌菌种老化是指菌种 (如 1 支试管斜面母种、1 瓶原种或栽培种)由于培养期间高温或培养时间过长而出现菌种 体外观的老化，这样的菌种直接生产效果不好，但经适当条件和方法活化后再用于生产，其优良性状仍可保持。如菌种 保藏机构保藏 6 个月的菌种，外观看起来很老的平菇母种，直接接原种不易萌发，但再经一次转管后仍可作母种使用。65、食用菌品种老化和菌种老化是一回事吗？食用菌品种老化和菌种老化是两个不同的概念。品种老化是指这个品种由于使用时间过长，其细胞群体发生老化， 这一老化是不可逆转的，不论给予多么适宜的环境条件，老化品种使用后常表现为生长缓慢、抗杂性降低、出菇延迟、 子实体变小、产量降低等不良性状。而菌种老化是指菌种由于培养过程中的高温或培养时间过长而出现的菌种外观的老 化，这些菌种直接用于生产效果不好，但经适当方法和条件活化后，再用于生产，其优良性状仍可恢复。66、退化食用菌品种在菌丝生长阶段有啥表现？退化食用菌品种在菌种生长阶段表现异常： （1）在母种生长阶段表现：第一，菌落形态不正常。如本来菌落平展的品种表现为菌落紧皱；丝状的气生菌丝变为雪 花状；气生菌丝变多变少或消失；菌丝色泽变化，如多数种品种在母种斜面上菌丝呈白色，退化品种呈微黄色、浅褐色 或其他颜色，或由鲜亮变暗淡；第二，菌丝倒伏，生长势变弱；第三，菌丝生长缓慢。在一定培养基和培养条件下，任 何品种都有其特定长速，过快或过慢都不正常，特别是过慢；第四，菌丝长速和长相不均一。一个优良品种的母种在扩 繁时，菌丝长速和长相无差别；第五，菌丝产生色素。大多数食用菌品种在母种培养阶段不分泌色素，只有在高温不良 条件下和老化时才分泌色素。如果培养期间就出现色素，表明品种退化严重。黑木耳和香菇如果在母种培养期间出现明 显的色素，均不能形成子实体。 （2）在原种和栽培种培养阶段表现：第一，接种物菌丝萌发缓慢，菌丝稀疏、纤弱无力；第二，菌丝吃料慢；第三， 菌丝体外观不丰满，色泽暗淡；第四，菌丝生长缓慢。 母种各项培养特征都是在特定培养条件下形成的，要准确有效鉴别就必须使用标准环境条件。如菌落气生菌丝多少 与培养基成分关系密切，使用通用 PDA 培养基与玉米粉加富培养基就没有可比性，使用普通葡萄糖和多维葡萄糖也没有 可比性。再如，培养温度直接影响菌丝长速和菌落形态，温度较低时生长慢，菌丝浓密，温度较高时生长虽快，但菌丝 稀疏细弱。因此，如有效地鉴别菌种质量，在菌种生产中必须使用标准条件。67、退化食用菌品种在出菇阶段有啥表现？退化品种在出菇阶段主要异常表现在： （1）接种物接种后菌丝萌发缓慢，发菌期延长； （2）菌丝纤细、稀疏，无力，色泽暗淡； （3）栽培袋污染率提高； （4）栽培袋发菌期菌丝联结不紧密，出菇期易散碎。 （5）出菇提早或推迟，畸形菇增加，菇体变小，菇香味变淡； （6）菇潮不集中；转潮慢； （7）出菇潮次减少，甚至出一潮菇后不再出菇，产量下降。68、老化食用菌品种有啥表现？老化食用菌品种主要表现在： 11（1）菌丝生长缓慢； （2）抗逆性和抗杂性降低； （3）出菇推迟； （4）子实体变小； （5）产量降低。 老化菌种直接使用效果差，但经活化后再投入生产，其优良性状仍可恢复。69、哪些人为因素会加速食用菌品种和菌种的退化？品种退化有两方面因素，一方面是品种本身自然变异；另一方面是人为因素造成的。我国品种退化问题比发达国家 严重得多，这主要是因为我们国家品种审查登记制度尚未完全建立，相应法律法规不健全，菌种生产分散，从业人员素 质差所致。具体表现在： （1）非品种化菌种的使用和无根据的“新品种”使用，造成品种不均一性，品种混乱。到目前为止，我国尚未完全建 立食用菌品种审定、认定和登记制度，种质资源管理也不规范，法律法规和管理制度不健全。由此出现了非品种化菌种 的大量使用，加剧了菌种的不均一性和异质性。在生产中，一些供种单位从其它单位引进一支试管母种，并冠以新名作 为“新品种”出售；更有甚者，为了追求经济利益，一个品种可当作任何品种出售，购买者要购买什么品种，这个品种 就是什么品种； 还有的个体食用菌研究所对食用菌子实体进行组织分离后， 未经出菇试验以及鉴定就将其培养物冠以“新 品种”之名。现在生产中使用的品种有 60％~80％都是这样的新品种，如平菇中蔬 10 号有江都 792、佛平、苏平 1 号等 名称，平菇 CCEF-89 有 P89、 89、平 89、黑 89 等名称。 （2）品种选育缺乏科学方法，品种性状描述量化不够，缺乏标准条件的限定，使达不到品种质量标准的菌种得以流传 和扩大。这类菌种通常使用时间不长，其遗传学异质性和不稳定性就表现出来，即出现“退化” 。实质上这并不是品种本 身的退化，而是未使用合格的品种，这是菌种不均一和不稳定性造成的。 （3）人为因素导致不良环境条件，如高温、高湿、通气不良、不适宜氮源、不适宜碳氮比、不适宜 pH 值等，造成菌 种退化。 （4）人为选择错误在菌种生产中时有发生。菌种在生长过程中，由于遗传突变、细胞退化、生理代谢改变及其积累而 出现不良的细胞群体。特别是那些小型菌种厂和栽培户专业知识和经验不足，又缺少先进的生产设备和检测条件，难以 鉴别正常与不正常的菌种，使不正常菌种得以使用和繁殖，甚至不正常母种继续繁殖扩大和生产。因此，菌种生产单位 和栽培户要从有信誉的科研单位、大专院校或菌种保藏机构引种。70、什么是食用菌抗逆性？抗逆性是指食用菌菌丝体或子实体忍耐不良环境条件的能力。抗逆性强的品种对栽培管理水平要求相对较低，易于 栽培和获得产量，在较粗放的条件和管理水平下，仍可获得较好收成。如中国农业科学院蔬菜所选育的平菇优良品种中 蔬 10 号，子实体冻结后，一旦恢复到正常温度，解冻后可继续生长，而在同一菇房的美味侧耳子实体解冻后出水萎蔫并 死亡。可见中蔬 10 号比美味侧耳子实体耐冻性强。 71、什么是食用菌抗杂性？ 抗杂性是专指食用菌抵抗多种有害微生物侵染或污染的能力。不同种类的食用菌，或相同种类的不同品种，抗杂能 力都不同，如人工栽培的平菇，佛罗里达侧耳系列品种抗杂性普遍高于美味侧耳品种，而美味侧耳品种普遍高于纯白色 低温品种。72、进行食用菌品种审定有哪些程序？国家鼓励和支持单位和个人从事食用菌品种选育和开发，鼓励科研单位与企业相结合选育新品种，引导企业投资选 育新品种。选育的新品种可以依法申请植物新品种权，国家保护品种权人的合法权益。食用菌品种选育者将选育的品种 自愿向全国农业技术推广服务中心提出申请，申请食用菌品种审定或认定。全国农业技术推广服务中心成立食用菌品种 审定委员会，承担品种审定的技术鉴定工作。提供材料包括《品种认定申请书》《省级品种审定证书》《品种选育技术 、 、 报告》《品种性状说明》 、 、出发菌株母种、选育品种母种、选育过程、区试试验报告、分子生物学鉴定图谱（酯酶同工酶 电泳谱带）等材料。73、食用菌品种包括哪些农艺性状？食用菌品种特性是鉴别食用菌菌种或品种优劣的重要标准之一。一般包括温度、湿度、酸碱度、光线、氧气和二氧 化碳的要求，抗逆性、丰产性、出菇迟早、出菇潮数、栽培周期、商品质量及栽培习性等农艺性状。农艺性状主要是指 与栽培有关的品种的性状，常包括对温度、基质含水量、酸碱度、氧气和二氧化碳的要求、抗逆性和抗杂性、产量潜能、 12出菇周期、菇潮状况、耐贮运等诸多方面。74、啥是食用菌困菌？食用菌必须在发育起点温度以上才开始正常生长发育，发育起点温度以上温度的总和称有效积温。有效积温受温度 和发育时间两个因素影响，公式表示为：W＝NT，其中 W―积温常数，N―发育天数，T―发育期间的日平均温度，式中的 T 应减去发育起点温度（一般为 5℃） 。也就是说不同食用菌品种在出菇（耳）前菌丝生长需要达到一定的有效积温才能 出菇（耳） ，这个食用菌困菌就是使其达到有效积温，也就是我们常说的后熟。如黑木耳长白 7 号、黑 916、黑 29 等中、 晚熟品种在代料栽培过程中，长满菌袋后应后熟 10~60 天，达到有效积温后，才可进行开袋催耳，达不到有效积温不出 耳。香菇品种 L939 和 L135 在南方福建、浙江表现好，但在吉林省试种后，表现为出菇晚，究其原因是由于南方气温高， 发菌期短，因此出菇早；而东北地区由于气候冷凉，发菌期长，在相同时间内达不到有效积温，所以延迟出菇，表现为 第一年不出菇或仅少量出菇。二、设施与设备 75、食用菌菌种生产场地和栽培场地如何选择？食用菌菌种厂和栽培厂选择场地首先是选在 300 米之内无畜禽圈舍，2 公里范围内无垃圾（粪便）场的地方。如果 没有这样理想的场地，一般栽培户也可以选择村屯的上风口位置，以免造成污染和病虫害发生；其次是地势高燥、座北 朝南、通风良好、排水畅通；第三是要求场区内水电齐备、交通便利，但是根据我国目前生产条件，也可以灵活掌握。76、菌种厂如何设计？食用菌菌种生产和栽培场地布局是否合理，关系到生产效率及成品率高低，直接影响食用菌生产经营的盈亏。食用 菌菌种生产和栽培场地布局有一些应注意的共同原则，如地形、方位、季风向、生产规模、工艺流程、走向等，都应作 统筹安排，防止交叉安排布局，引起生产混乱。 （1）大型食用菌菌种和生产场所：应包括制种、栽培、经营管理及仓库等 4 部分。西北角为原材料堆放场和晒场，也 是培养瓶堆制场地。由此向西南角分别为原料仓库、车库等，对角线开设两道进出料门。库房与配料、分装车间为种瓶 堆放场所。从配料室、分装室到灭菌室再到冷却室、缓冲室、接种室，应成为―条龙走向。一个有一定规模的食用菌生 产场，无论一个季节或周年生产多种食用菌都需设多间培养室，以适应多场及二场制栽培。除此以外，食堂、卫生间、 浴室、锅炉间和煤堆放场，均应设在场地东北角。栽培场地应远离制种区。为了净化食用菌生产场的空气，应搞好绿化， 设立栽培废料灰化、沤制或再利用处理场区。总之，要按照自身情况，因地制宜地规划成“一”字或“L”字型布局。 （2）庭院式家庭菇场或生产专业户：只能利用空余房间、房前屋后宅地，合理安排，栽培废料放在远离制种区的田间， 以利作为肥料还田。把制种培养室和栽培场隔开。栽培场利用自然场地或搭建简易菇棚，防止人、菇不分家，生产人员 吸入过量孢子而引起疾病，特别是平菇栽培更应特别注意。77、食用菌菌种和生产厂房包括哪几部分？一个食用菌菌种和生产厂房应该包括摊晒场、原料库、配料室、灭菌室、接种室、培养室、出菇室和贮存室等，有 条件的还应设置检验室等，其中这些厂房应该按照顺序设置，防止因为设置不合理而造成污染和窝工现象。个体栽培户 也可以根据自己的栽培规模简单设置成配料灭菌室、接种培养室和出菇室三部分。78、菌种为啥要采用工厂化工艺流程进行生产？食用菌菌种生产厂房必须按照生产工艺流程进行设计和生产，按照摊晒场→原料库→配料室→灭菌室→接种室→培 养室→贮存室顺次进行，只有这样，才能降低污染率，提高成功率，降低劳动力成本，防止因设置不合理而造成污染和 由于设计不合理而造成窝工等现象的发生。79、拌料室和装瓶（袋）室有何要求？拌料室和装瓶（袋）室往往是一个地方，所以拌料室和装瓶（袋）室内要有水源和电源，并且有上下水和暖气，以 保证拌料用水、排放污水和室内装袋温度。拌料装袋场地要光滑（如水泥地面、橡胶制品或塑料布上） ，否则会造成大量 扎袋现象而感染杂菌；装袋室温度要保证在 15℃以上，装袋前将袋放在温度高地方预热。装袋室温度过低，塑料袋因冷 凉而发脆、折裂，造成破损和漏气。80、无菌接种室有何要求？无菌接种室一般以 4~6 平方米大小较为适宜，无菌接种室设置缓冲间及接种室。缓冲间和接种室宜安装移动拉门， 防止空气流通，并各按装一个 30 瓦紫外线灯和一个 40 瓦的日光灯，紫外线灯高度不超过 2.2 米，用来消毒灭菌；日光灯 用于接种时照明使用，地面采用水泥地面，墙壁应光滑，地面不要用油漆粉刷，以免油漆吸收紫外线而降低灭菌效果。81、食用菌培养室有何要求？食用菌培养室应根据栽培规模、技术熟练程度等具体情况来确定，一般培养室在 50 平方米以内，超过 100 平方米的 培养室应改造成 2 个培养室，防止由于接种技术不熟练造成交叉感染，而且也不利于管理。利用房屋或简易房作为培养 13室，通风较差，可以进行改造。在窗子的上方按装排风扇，在房间内放置培养架，培养架规格根据房间大小搭建。简易 培养室建在窝风向阳的地方，采用钢筋、木材塑料大棚膜搭建。一般规格为长 10~20 米，宽 6~8 米，简易培养室脊高 2.8 米，侧高 2.5 米，棚内摆放培养架，在简易棚的两侧开通风地窗（低处）和排气孔（高处） ，每 30~50 平方米设 1 个地窗 和 1 个排气孔；用砖铺地面，并撒石灰粉降湿，做好前期保温和排湿工作。82、为何食用菌灭菌室和接种室互相连接？大型食用菌菌种生产厂家灭菌室和接种室一般都是互相连接的，这是因为： （1）降低生产成本。从生产工艺流程方面要求灭菌后的菌种瓶（袋）需要冷却和接种，只有最近才能节省搬运和运输 的劳动力成本； （2）提高食用菌生产的成功率。灭菌后的菌种瓶（袋）需要冷却和接种，如果二者不是互相连接，由于运输经过冷凉 或者有杂菌污染的地方，会增加菌种瓶（袋）感染杂菌的几率，降低生产成功率； （3）便于生产者操作和企业的管理。只有按照生产工艺流程进行生产，才能有利于生产者操作，并且有利于管理人员 进行管理，实现复杂问题简单化，真正做到节能降耗，提高生产效率。83、为何设置食用菌菌种检验室？食用菌菌种生产厂家是生产和销售食用菌菌种的场所，在保证技术人员素质的前提下，还要保证菌种的纯正，强壮 等要求。这就需要技术人员和管理人员互相配合，生产出合格的食用菌菌种，但是菌种在出厂前，尤其是大批量菌种在 出厂前一定要进行抽查，并且进行质量检验，达到菌种生产要求后方可出厂，所以菌种生产厂家一定要设立菌种检验室。84、菌种厂或大规模栽培厂为何设焚烧炉或杂菌填埋坑？食用菌菌种生产厂或栽培厂经常发生杂菌污染现象，污染严重的栽培袋就不能再利用了，因为污染的培养料内含有 杂菌产生的抗生素，而抗生素会抑制食用菌菌丝生长发育，菌丝生长缓慢，影响产量和质量，没有利用价值。所以应该 设置焚烧炉或杂菌填埋坑，将污染严重的菌种深埋或放入焚烧炉内焚烧掉，防止杂菌再次侵染。85、生产母种需要哪些设备和小型工具？生产食用菌母种设备主要包括手提高压锅、接种室、恒温培养箱、铝锅、量筒、烧杯、灭菌筐、天平、接种工具、 塑料筐、酒精灯、酒精瓶、三角漏斗、胶圈、止水夹、铁架台、胶管、过滤纱布和小型喷雾器等设备与工具；小型生产 工具包括记号笔、操作台、剪刀、玻璃棒、记录本、温度计、干湿温度计、载玻片、盖玻片等工具。86、生产原种和栽培种需要哪些设施？生产食用菌原种和栽培种的设备包括搅拌机、装瓶机、高压蒸汽灭菌锅或常压蒸气灭菌灶、超净工作台或接种箱、 离子风机、电热恒温培养箱以及冷藏箱、调温设备、显微镜等；小型用品主要包括酒精灯、天平、地秤、镊子、接种针、 接种耙、接种钩、接种铲、试管、菌种瓶、漏斗、电炉或煤炉、温度计、干湿温度计、量筒、量杯、水桶、盆、铝锅、 塑料绳、报纸以及广泛 pH 试纸等，这些工具虽小，但是缺一不可，必须在生产前购齐。87、家庭用高压锅能灭母种培养基吗？家庭用高压锅可以用于母种培养基的高压灭菌。但要注意由于家庭用的高压锅高度不够，再加上母种培养基要求灭 菌时间比较长，所以在加水上一定要注意别干锅，同时还要注意试管不能平放，应该倾斜 45 度以上，并且注意试管底部 不要放入水中，以免灭菌不彻底，使用时，当冷空气排净后再放压力阀，当压力阀开始自动排汽时，将火力减小，并且 开始计算时间，25~30 分钟后关闭火源，冷却后打开压力阀开锅即可。88、手提式高压灭菌器如何使用？手提高压灭菌器属于小型高压灭菌设备，这种灭菌锅容量小，约 14 立升，主要用于食用菌试管母种（一级种）培养 基、无菌水等器具的灭菌，一般一次可以灭 120~150 只试管。灭菌时间短，经济适用，对培养基的营养成分破坏小，食 用菌栽培户栽培规模较大时可以购置进行母种扩繁。89、常压灭菌锅有几种类型？常压灭菌锅的类型较多，比较常见的有 4 种类型：简易常压蒸汽灭菌锅、圆形蒸汽灭菌灶、常压蒸汽灭菌箱和产气 灭菌分离式灭菌灶。而常压蒸汽灭菌箱比较常用，可以采用周转筐和平板车进行半机械化生产，下面简单介绍一下常压 蒸汽灭菌箱的规格和建造方法： 常压蒸汽灭菌箱一般采用铁板和角铁焊制而成， 规格为长×宽×高＝235×136 ×172 厘米的长方形铁箱， 顶部呈圆拱形， 防止冷凝水打湿棉塞，距离底部 20~25 厘米高放置一个用钢筋焊制的帘子；如果为了节省燃料也可以在帘子下焊接 4 排 直径 10 厘米的铁管，管口一头在底部前端燃料燃烧处，作为进烟口，一头从另一头汇聚一起与烟道连接（节能灶） ；门 在一头，规格为 90 ×70 厘米，底高 20 厘米，在门一头下侧安一个排水管，中间安一个放气阀，顶部安一个测温管；一 14般采用周转筐装出锅，可以防止菌袋扎破，并且节省劳动力成本，一般采用 2 套周转筐即可，一次可以灭菌 1300 袋左右。 这种类型的灭菌锅大多在食用菌菌种生产、黑木耳代料栽培、金针菇栽培、珍稀食用菌栽培等灭菌使用。90、小型常压灭菌锅如何建造？小型常压灭菌锅有两种类型，一种是简易常压蒸汽灭菌锅，一种是圆形蒸汽灭菌灶，下面介绍两种小型常压灭菌锅 的规格和建造方法： （1）简易常压蒸汽灭菌锅：用 1 口直径 85 厘米的铁锅和砖、水泥搭建一个灶台，在灶台上方的房梁上顶部安放一个 铁挂钩，并且用大棚塑料膜制作一个周长 3 米的塑料桶，上头用绳子系好吊在铁挂钩上，下部将锅上部的灭菌物罩住并 且压在灶台上即可。这种类型的灭菌锅比较简单、成本低，但灭菌数量较少，适合初学者和小规模食用菌栽培户采用。 （2）圆形蒸汽灭菌灶：采用直径 110 厘米的铁锅和砖、水泥搭建灶台，在灶台上用砖和水泥砌成 120~130 厘米的正方 形灭菌室，高 130~150 厘米，上部用水泥封顶，在灭菌室下部预留一个加水口，并且安放一个铁管，在一侧留一个规格 为宽×高＝65×85 厘米的进出料口，并且用木方作木门封进出料口；也可以用铁板焊制一个圆形的铁桶，直径 130 厘米， 高 130~150 厘米，在铁桶下部焊一个铁管做加水口，用塑料膜封锅口，这种类型的灭菌锅优点是半熟料灭菌出料方便， 不易感染杂菌，适合 1~2 万袋栽培规模使用而且栽培品种为平菇熟料栽培、香菇熟料袋栽、滑菇半熟料盘栽和袋栽等。91、大型实用灭菌锅如何建造？一般大型食用菌栽培厂或栽培户可以采用产气和灭菌分离式灭菌灶，其结构分为蒸汽发生器和蒸汽灭菌池两部分。 蒸汽发生器是用 1 个或 2 个并列卧放的柴油桶制作而成， 先在油桶上方开 2 个直径 3.5 厘米的孔洞， 一个焊接一根塑料软 管作为热蒸汽的连接管道，另一个焊接一根距离桶底 10 厘米的铁管作为加水管，然后用砖砌成一个简易炉灶。蒸汽灭菌 池可以在栽培场地中间建造，先向地下挖 30 厘米深泥池，然后用砖和水泥砌成一个 2×5 米的长方形水泥池，在池底留一 个排水口，能够使灭菌后的冷凝水排出；在距池底 20 厘米高处固定一个用钢筋焊接的帘子，灭菌时将灭菌瓶（袋）或周 转筐放在帘子上方，高度可以根据灭菌数量和炉灶的承受能力确定。然后用苫布和大棚塑料膜将灭菌物盖严压好，并且 将蒸汽软管通入灭菌池即可。这种类型的灭菌锅优点是适合 5 万袋以上大规模生产使用，灭菌和接种在一个地方，解决 了由于运输而造成污染率高的问题，同时节省人工，适合平菇熟料栽培、香菇熟料袋栽和滑菇熟料袋栽等。92、栽培不同食用菌为啥选用不同类型灭菌锅？栽培不同类型的食用菌应该采用不同类型的灭菌锅，这是因为： （1）不同种类的食用菌栽培方式不同，灭菌方式也不同； （2）不同食用菌栽培户生产规模不同，掌握的栽培技术也不同； （3）不同地区食用菌栽培户由于生产习惯不同，采用的灭菌锅类型也不同。 （4）不同类型常压灭菌锅优点不同，适合不同栽培户。如简易常压蒸汽灭菌锅结构简单、成本低，但灭菌数量较少， 适合初学者和小规模食用菌栽培户采用；圆形蒸汽灭菌灶有进出料口，半熟料灭菌出料方便，且不易从锅口感染杂菌， 熟料袋栽进出锅也方便，适合平菇熟料栽培和滑菇半熟料盘栽和袋栽；常压蒸汽灭菌箱移动灵活，大多在食用菌菌种生 产、黑木耳代料栽培、金针菇栽培、珍稀食用菌栽培等灭菌使用，且采用周转筐装出锅，可以防止菌袋扎破，并且节省 劳动力成本，一次可灭菌 1300 袋；一般大型食用菌栽培厂或栽培户采用产气和灭菌分离式灭菌灶，这种类型灭菌锅优点 是灭菌数量大，可以移动，灭菌和接种可以在一个地方，解决了由于运输而造成污染率高的问题，同时节省人工，降低 成本，适合平菇熟料栽培、香菇熟料袋栽和滑菇熟料袋栽。93、如何选用拌料机？拌料机是将主料和辅料加适量的水进行搅拌，使之均匀混合的机械，主要用来替代人工拌料，目前食用菌生产上常 用的小型拌料机有福建古田农机研究所研制的 WJ-70 型、WJ-80B 型拌料机，辽宁省朝阳市食用菌研究所研制的 BLJ-200 型，枣庄市第二农业机械厂生产的 JB-100 型原料搅拌机、JB-50 型原料搅拌机。一般食用菌培养料搅拌每筒可投料 100 千克，搅拌时间为 3~5 分钟。栽培规模在 5 万袋以下的食用菌栽培户不需要拌料设备―拌料机；而栽培规模在 5~10 万袋 的栽培户应采用小型拌料机；栽培规模在 20 万袋以上的，应采用大型拌料机。94、如何选用装袋机？食用菌菌种生产厂家和栽培户大多产用装袋机装袋，一般家庭生产采用小型立式装袋机或小型卧式多功能装袋机。 （1）小型立式装袋机：主要是把拌好的培养料填装到一定规格的塑料袋内，一般每小时可以装 250~300 袋，多用于黑 木耳栽培户，特点是装袋紧实，中间通气孔可以打到袋底，缺点是只能装一种规格的塑料袋。 （2）小型卧式多功能装袋机：小型卧式多功能装袋机主要是把拌好的培养料填装到各种规格的塑料袋内，一般每小时 可装 200 袋。优点是各种食用菌栽培都可以使用，料筒和搅龙可以根据菌袋规格进行更换；缺点是装袋质量和速度受操 15作人员熟练程度影响大。一般栽培食用菌种类较多时可以选用此种机型的装袋机。95、有食用菌拌料装袋一体机吗？食用菌拌料装袋一体机是有日本和中国的台湾省引进到我国的，也叫大型立式冲压式拌料装袋设备，它与小型立式 装袋机原理基本相同，但是需要与拌料机、传送装置一起使用，而且是连续作业，一般每小时可以装 1200 袋，多用于大 型菌种生产厂家或金针菇、黑木耳以及珍稀食用菌栽培户的工厂化生产。96、如何选用粉碎机？粉碎机主要用来粉碎食用菌栽培的原材料――木屑，如将木材粉碎成木屑，将玉米芯粉碎成玉米芯粉等，一般粉碎 机包括木材切片机、木片粉碎机和切片粉碎机 3 种类型： （1）木材切片机是将阔叶树或硬杂木的枝桠材切成木片的机械，然后再经过粉碎机将木片粉碎成木屑，作为食用菌的 培养原料。一般都需要 10~13 千瓦的配套动力或 S195 柴油机，每小时可以加工 1.5~3 吨木片。吉林省东部和东南部山区 有林木资源的栽培户可以选择使用。 （2）木片粉碎机：是将切好的木片经过晾晒风干后进行粉碎，通过筛孔直径控制木屑大小，而且还可以粉碎作物秸秆 等。目前由于食用菌发展迅猛，原材料资源非常紧张，需要林业的枝桠材进行粉碎栽培食用菌。而食用菌对培养料粗细 度还有一定要求，如果粉碎过粗，容易扎破菌袋，引起杂菌感染，同时培养料之间空隙过大，不保水，使培养料水分容 易散失；如果粉碎过细，培养料透气性差，菌丝生长速度慢，菌丝老化，生长周期延长，所以需要使用木片粉碎机。木 片粉碎机每小时可生产木屑 70~300 千克，需要 10~13 千瓦配套动力或 S195 柴油机，此机械与木片切片机配合使用。 （3）切片粉碎机：是切片和粉碎两用机，能将木材、枝桠材以及玉米秸等植物加工成屑，一机多用，一般每小时可生 产木屑 700 千克，秸秆屑 500 千克，自配 15 千瓦电机或 11 千瓦柴油机。97、如何选用铡草机？铡草机也叫切秆机，主要用于生产食用菌的原料―农作物秸秆的切断，以便进一步粉碎或直接使用，目前农村使用 的各种类型的铡草机都可以用于食用菌生产， 一般铡草机需要配套动力为 5.5 千瓦或 S195 柴油机， 每小时可生产 100~150 千克稻草。98、接种需哪些设备？接种设备是食用菌制种和栽培的关键技术设备，接种设备主要有接种箱、接种室（帐） 、离子风机等。在选择接种设 备时要根据食用菌栽培种类、栽培规模和技术类型来确定接种设备。其中接种箱适合一家一户小规模生产使用，但受接 种技术熟练程度和操作人员影响大；而简易接种帐可以随意移动，成本低，但是要注意它的密闭性，密闭性不好，接种 效果差；离子风机接种效果好，但要按照说明书进行使用，一定要注意使用方法。97、接种箱是啥规格？如何使用？（1）接种箱规格：接种箱是一个既密闭但又能开启的小木箱，它用木板和玻璃制做而成，接种箱的形状和规格有两种， 一种是一面接种的，另一种是两面接种的。接种箱的前后装有两扇能开启的玻璃窗，下方开两个圆洞，洞口装有袖套， 为便于散热和换气，也可在两侧留孔径 8 厘米、并用 8 层纱布覆盖的通气孔。顶板上安装 30 瓦紫外线灯和 40 瓦日光灯 各一支。接种箱容积一般以能放下 80~150 袋为宜，适合于一家一户小规模生产使用，也适合小型菌种厂制种使用。 （2）使用方法：接种前先用 2％~3％来苏儿水溶液喷雾，再用气雾消毒剂对空间进行熏蒸消毒，半小时即可接种。如 双人接种原种，一人拿原种瓶，拔开原种瓶棉塞，另一人在酒精灯旁火焰旁取下棉塞，并用火焰灼烧接种铲或接种针， 然后在试管母种斜面上切取约 1.5 平方厘米菌丝连同培养基块一起迅速移入原种瓶中， 然后将棉塞经火焰消毒后塞上。 如 单人接种原种时，可将原种瓶放置在接种架上，使酒精灯与原种瓶口相距 1.5 厘米。随后按上面操作接入母种即可。 99、接种箱使用有哪些注意事项？ 使用接种箱主要有以下 5 点注意事项： （1）要求接种箱密闭性好； （2）接种箱在接种前应先用 3％来苏儿水溶液喷雾，然后再点燃气雾消毒盒熏蒸，用量是 4 克/立方米，半小时后方可 使用； （3）接种箱在接种前应该准备好接种工具、菌种和已经灭菌的培养基等，接种数量不宜过多，否则操作不便； （4）接种箱接种受接种人员影响较大，要严格遵守操作规程； （5）接种箱适合小规模生产使用，大规模生产由于操作人员多而技术管理不当会使污染率提高，不适合使用。 100、接种帐是啥规格？ 简易接种帐就是采用塑料大棚膜制作而成的简易接种设备，它类似我们日常生活中的蚊帐，但是进入的开口处一定 16要搭接一米以上。规格分大、小两种，小型接种帐规格为 6 平方米（也就是 2×3 米） ，较大规格接种帐一般在 12 ~16 平 方米，即 3~4×4 米，接种帐高度 2~2.2 米，下面一定要放到地面并且有余，以便接种时用周转筐压实，防止透风，过高 则不利于消毒和灭菌。101、离子风机接种效果咋样？离子风机是一种灭菌设备，1988 年国内辽宁省营口市净化设备厂率先将离子风机应用于食用菌的无菌接种。它与紫 外灯灭菌原理基本相同，它是通过高压电极将空气中的氧气变成臭氧，达到杀菌目的。一般离子风机有大小之分，它的 有效接种范围根据不同的机型也不同，应根据说明书正确使用；其接种效果相当于超净工作台，污染率不超过 5％。102、使用离子风机有哪些注意事项？使用离子风机应该注意以下 6 点： （1）离子风机接种要求在密闭的室内进行； （2）离子风机金属部分易受到气雾消毒剂熏蒸的腐蚀，熏蒸时应将离子风机拿出接种室，而且喷雾消毒时应将离子风 机前的金属部分盖好，防治正负极放电； （3）要求电源电压稳定，一般农村晚间用电量大、电压低而达不到灭菌要求，可在白天电压稳定时使用； （4）接种前半小时在室内先喷 3％来苏儿或 5％新洁尔灭除尘消毒，净化消毒后，再打开离子风机，5 分钟后在离子风 机正前方 20~30 厘米有效范围内接种； （5）接种人员在接种过程中不要正对离子风机，尽量将面部与离子风机产风部位错开，防止长期接种发生脑供氧不足 而头晕、恶心等症状； （6）离子风机使用后应经常用棉花蘸酒精擦正负极上的灰尘，吸尘过多电离臭氧量会降低而达不到灭菌效果。103、可以用热风接种吗？除了采用接种箱、接种帐和离子风机外，食用菌接种还可以采用热风接种，也就是干热接种法。干热接种法是用 800~1000 瓦的电炉子，炉盘上罩上金属网罩，防止菌块掉到炉盘上，通过干热形成无菌区，进行接种，接种效果好，只 适用于小规模生产和生产原种时使用，大规模生产则不适用。104、可以用蒸汽法接种吗？食用菌接种也可以采用蒸汽法接种，蒸汽法接种是用一个电热水壶，上边开口用铁皮焊成一个高 20 厘米、下口直径 10~12 厘米、上口直径 20 厘米左右的铁桶。使用方法是采用电热水壶加热产生蒸汽后，在蒸汽上接种，蒸汽接种前，室 内应密闭喷雾除尘，并关闭门窗。105、怎样自制恒温培养箱？如何使用？如果我们是自己生产使用，也可以自制恒温培养箱，下面就介绍两种恒温培养箱的制作方法： （1）夹柜式恒温箱：箱体用双层木板制成，双层间空隙 5 厘米，填塞棉花、锯末或稻壳灰。以便隔热保温。箱内尺寸 为 45×45×70 厘米 3，共分三层，上两层高度均为 25 厘米，在分层放盘架处的两侧，分别钉上小木条以放置活动盘架。盘 架用 6 毫米钢筋制成方框，中间再用粗铁丝编成。下面一层为加热层，可用电热丝或电灯泡加热。若用电灯泡，根据室 温和恒温箱的保温程度，用 1 只 25~60 瓦的电灯泡即可。为避免灯泡强光影响菌丝发育，下面第一层盘架上可垫一块白 铁皮或硬纸板，以遮挡光线。箱顶中央，钻一孔安放一支套有橡皮塞的温度计，其下端应浅插入箱内，以免在箱顶上观 测不到液柱，以及往箱内放物品时碰坏温度计。箱顶上还应钻 8~4 个直径 0.5~1 厘米的排气孔，若箱内熏蒸灭菌时可用 纸卷或棉球塞住。箱右侧后上方安装自动控温器，旋钮和刻度盘及电源开关均安放箱外。箱门采用双层，上部装一小块 玻璃以供观察。自制恒温造价低廉，一般食用菌爱好者或专业户均可制作。 （2）钢筋棉褥恒温箱：箱体用钢筋焊成框架，六个内面用棉被作为隔热保温层。(棉被所用布、棉均须洗净后曝晒消 毒)，然后按框架尺寸缝制成一个整体。为保证隔热效果，棉褥内外两面均须加一层聚乙烯}