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谁做过膜过滤法测水中大肠菌群
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长的好些菌,都红红紫紫的怎么办
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步驟 水樣在進行檢測或稀釋之前必須劇烈搖晃25次以上，以使樣品充分混搖均勻。 水樣體積之選擇取決於預期的大腸桿菌（群）的密度。飲用水水樣以100 mL全量過濾。其他樣品則視水樣中大腸桿菌（群）可能濃度範圍進行水樣稀釋步驟。使用無菌吸管吸取10 mL之水樣至90 mL之無菌稀釋液中，形成10倍稀釋度之水樣，混搖均勻。而後自10倍稀釋度水樣以相同操作方式進行一系列之100、1000倍等稀釋度水樣，並混搖均勻。進行上述稀釋步驟時，均需更換無菌吸管。各稀釋度水樣之稀釋步驟如圖一所示。 以無菌鑷子夾起無菌濾膜，放在無菌過濾裝置之有孔平板上，小心將漏斗固定。將過濾裝置接上抽氣幫浦。加入適量無菌稀釋液，以測定過濾裝置是否配置妥當。 檢測飲用水或水源水質時，可過濾100 mL或更多的水樣體積。其他水樣視大腸桿菌（群）可能濃度範圍，以無菌吸管吸取10 mL的原液及（或）各稀釋度水樣至無菌過濾器中過濾。過濾後，再以20至30 mL之無菌稀釋液沖洗漏斗二至三次。每個稀釋度水樣均需進行兩重複。 沖洗過濾後，解開真空裝置，將漏斗移開，儘速以無菌鑷子取出過濾後之濾膜置於培養基上。濾膜應與培基完全貼合，避免產生氣泡。培養皿倒置於35±1℃的恒溫培養箱中培養24±2小時。 過濾不同稀釋度水樣時，應更換無菌過濾器（漏斗）。亦可將過濾器（漏斗）以火烤或紫外線滅菌2分鐘以上之後重複使用。 計算並記錄各稀釋度培養皿中所產生的紅色、藍色及紫色菌落數。若上述之菌落過多造成判讀困難，則以”大腸桿菌群菌落太多無法計數”（Total coliform toTC TNTC）表示。若藍色及紫色菌落過多造成判讀困難，則以”大腸桿菌菌落太多無法計數”（E. coli
toEC TNTC）表示。 結果處理（計算實例請參照表一） 選取菌落數介於20至60間之同一稀釋度的兩個培養皿，計算其菌落數，以菌落數（ CFU）/100mL 表示之。計算公式如下： 大腸桿菌菌落數（CFU/100mL）　　= 所選取培養皿之藍色及紫色菌落數總合 ×100 所選取培養皿之實際水樣體積總合 大腸桿菌群菌落數（CFU/100mL）　　= 所選取培養皿之紅色、藍色及紫色之菌落數總合 ×100 所選取培養皿之實際水樣體積總合 培養皿之菌落數不在20至60個菌落之間時，則依菌落數實際數目以下列方式處理： 若原液及各稀釋度水樣中僅有一個稀釋度的一個培養皿菌落數在20至60 個之間，仍依上述公式計算之。 若僅原液有菌落產生，且少於20個，應依上述公式計數菌落數;若原液培養皿中均無菌落生長，則菌落數以小於1 表示。 若各培養皿之菌落數均不在20至60個之間，則選取最接近60個菌落數之同一稀釋度的兩個培養皿，依上述公式計算之。 數據表示：若計算所得之菌落數小於1，以”＜1”表示；菌落數小於100時，以整數表示（小數位四捨五入）。菌落數大於100 以上時，取兩位有效數字，並以科學記號表示，例如菌落數為142時以1.4×102 表示之，菌落數為155時以1.6×102 表示之，菌落數為18900時以1.9×104 表示之。 檢測報告必須註明採樣時間、接收水樣時間、樣品編號、開始和結束培養時間及各稀釋度的原始數據。 品質管制 微生物採樣及檢測人員應具備微生物基本訓練及知識。 進行微生物檢測時，所用的盛裝器具均應經滅菌處理。 每次採樣時，應製備一組運送空白樣品。 每批次或每十個水樣須進行一次試劑空白樣品分析。 新購入之培養基均須以已知的大腸桿菌群、大腸桿菌及非大腸桿菌群之菌株作測試，以確保數據品質。 應記錄所有稀釋度水樣的原始數據，以備查核之用。 每個稀釋度水樣至少須進行二重複。 滅菌釜、恒溫箱、水浴槽及冰箱等設備應定期校正以確保數據品質。 不定期以胰蛋白大豆瓊脂培養基測試濾膜、稀釋水等是否為無菌。 本方法培養所得之細菌可能具有感染性，檢測後之培養基及器皿應經高溫高壓滅菌始得以一般事業廢棄物處理。 使用紫外光燈作滅菌時，檢測人員應小心避免暴露於紫外線之照射。 精密度及準確性
以酵素色質性（Chromocult）培養基篩選大腸桿菌群及大腸桿菌，挑選培養基上產生藍色的菌落102株，以VITECK菌種鑑定系統進行驗證，結果大腸桿菌的鑑出率大於87%，顯示偽陽性小於13%。而挑選培養基上產生紫紅色及粉紅色的菌落103株，以m-ENDO agar進行驗證，屬於大腸桿菌群比率大於85%，顯示偽陽性小於15%，另挑選培養基上透明及黃色菌落，經m-ENDO agar進行驗證，非屬於大腸桿菌群之比率大於80﹪，即偽陰性＜20%。
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为什么选择大肠菌群作为水源被肠道病原菌污染的指示菌
体中的病原微生物常因数量较少而难以检出,即使检出结果为阴性,也不能保证无病原微生物存在；同时检出手续也很复杂.所以,在实际工作中常借用检查水体中有无“指示菌”存在及其数量多少来判定水质是否被污染.大肠杆菌是人和许多动物肠道中最主要且数量最多的一种细菌,国家规定,每升饮用水中大肠杆菌数不应超过3个.在糕点面包微生物检验中 大肠菌群的验证试验怎么做?请给出详细步骤,谢谢,我是新手,满意答案加分,谢谢_百度作业帮
在糕点面包微生物检验中 大肠菌群的验证试验怎么做?请给出详细步骤,谢谢,我是新手,满意答案加分,谢谢
1、抽检样品；2、配置NaCl溶液,放入样品,震荡混合；3、抽取样品溶液,放入小试管（10ml）；4、抽取1ml放入培养皿中,然后倒入46C营养琼脂,摇匀；5、待冷却后翻转培养皿,放在36C的培养箱中培养；
根据GB 4789.3检测大肠菌群。不懂回复！
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为什么选择大肠菌群作为水源被肠道病菌污染的指示菌
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按GB 4789。
4.1，经培养后。
4：按GB 4789、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌，则将所有产气的EC肉汤管分别转种于伊红美蓝琼脂平板上.10规定：
7 操作步骤
7：按GB .5 磷酸盐缓冲稀释液，同时接种乳糖发酵管，用单料乳糖胆盐发酵管。
4，选择三个稀释度。
4，然后取出.1 用接种环将所有产气的乳糖胆盐发酵管培养物(见7，换用1支1mL灭菌吸管：容量为500mL.2℃水浴箱内(水浴箱内的水面应高于EC肉汤液面)，查MPN检索表：按GB 4789，做成1∶100的稀释液、革兰氏染色为阴性的无芽胞杆菌。
5.5 显微镜。该菌主要来源于人畜粪便.10 广口瓶或三角烧瓶.1 温箱.5 报告
根据证实为大肠菌群阳性的管数.5±0，经充分振摇或研磨做成1∶10的均匀稀释液。
食品中大肠菌群数系以100mL(g)检样内大肠菌群最可能数(MPN)表示，置36±1℃温箱内培养24±2h.11 玻璃珠.3 另取1mL灭菌吸管.3 乳糖发酵管，即可报告为大肠菌群阳性.1 以无菌操作将检样25mL(或g)放于含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内予置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内。
7，故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量，置36±1℃温箱内。
5.2 用1mL灭菌吸管吸取1∶10稀释液1mL，按上条操作依次做10倍递增稀释液.3 恒温水浴，振摇试管混匀。
7，并做革兰氏染色和证实试验，1mL及1mL以下者。
4.8 试管。
7：36±1℃。
4，推断食品中有否污染肠道致病菌的可能.12 载玻片。
4，则证实为粪大肠菌群阳性，凡平板上有典型菌落者：按GB 4789.7 平皿，培养18～24h：按GB 4789.13 酒精灯，报告每100mL(g)大肠菌群的MPN值，每递增稀释一次.28 食品卫生微生物学检验 染色法，观察菌落形态.6 生理盐水。
7.4 证实试验
在上述平板上.14 试管架.28中4。
3 引用标准
GB 4789，则按下列程序进行.2条)转种于EC肉汤管内。凡乳糖管产气.4 EC肉汤。
5 培养基和试剂
5，以8 000～10000r&#47。
4，挑取可疑大肠菌群菌落1～2个进行革兰氏染色。每一稀释度接种3 管，接种量在1mL以上者，培养24±2h、培养基和试剂
4 设备和材料
4.4 天平。
7：44.7 革兰氏染色液，用双料乳糖胆盐发酵管。
大肠菌群系指一群能发酵乳糖：0～4℃，置 36±1℃培养18～24h。
4.1；如有产气者.28中3.6 均质器或乳钵.2 冰箱.5℃.25沥规定，则可报告为阴性.1;min的速度处理1min.1 检样稀释
7.1 乳糖胆盐发酵管，注入含有9mL灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内，如所有乳糖胆盐发酵管都不产气，做成1∶10的均匀稀释液。
4，如有产气者，观察产气情况.5±0，每个稀释度接种3管.11规定：直径为90mm.4 根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计，查MPN检索表、产酸产气，培养24±2h.28中4，置44.28中4：直径约5mm。
8 粪大肠菌群(faecal coliform)
4.2规定.22规定.9规定。
5.2 伊红美蓝琼脂平板.2 结果报告
根据证实为粪大肠菌群的阳性管数，则可报告为大肠菌群阴性，置36±1℃温箱内。
5.9 吸管，如所有EC肉汤管均不产气。
本标准适用于食品中大肠菌群的测定。固体检样最好用均质器。
6 检验程序
大肠菌群检验程序如下.3 分离培养
将产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂平板上.2 乳糖发酵试验
将待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内大肠菌群测定
1 主题内容与适用范围
本标准规定了食品中大肠菌群的测定方法，报告每100mL(g)粪大肠菌群的MPN值。
因为人的粪便中含大肠菌，要是说被粪便污染了多恶心！说大肠菌又文明又好听。
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出门在外也不愁用大肠菌群作为肠道病菌的指示微生物，有什么缺点？_百度知道
用大肠菌群作为肠道病菌的指示微生物，有什么缺点？
提问者采纳
用大肠菌群作为肠道病菌的指示微生物，其缺点在于只间接反映出生活饮用水被肠道病原菌污染的情况，而不能反映出水中是否有传染性病毒以及除肠道病原菌外的其他病原菌。
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肠菌群有四种菌，水中难降解的有机物在污泥中最多，选择不同的有机物检测。厌氧比好氧能降解更多的难降解物质。好氧处理比厌氧处理反应速度快，检测不是全部的菌数，有生活在温血动物体内，有生活在冷血动物体内，故采用厌氧降解法参考资料
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