胆固醇水溶液中的离子平衡问题

高效液相测胆固醇中,皂化浓缩后无法用乙醇溶解 - 食品 - 小木虫 - 学术 科研 第一站
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高效液相测胆固醇中,皂化浓缩后无法用乙醇溶解
我是做“乳酸菌体外降胆固醇实验”的,在培养基加入了胆固醇胶束溶液,培养后,离心取上清液测胆固醇,采用的是《食品中胆固醇的测定》GB/T2
(高效液相色谱法)。
& && & 在完成皂化提取的步骤后,在浓缩这一步出现了问题:即无法用无水乙醇完全溶解平底烧瓶中的残留物,这些残留物是有点像甘油的透明物质,加热,超声都无法解决。但是按原理说是乙醇时可以溶解甘油的,也不知道里面是什么物质,为什么不能用乙醇来溶解。后来用甲醇也无法溶解(甲醇为流动相),而国标上是直接用无水乙醇溶解。
& &&&当然用氯仿等其他有机物可以溶解,但是氯仿会对液相的反相柱有伤害,而其他有机物比如叔丁醇、正己烷等,则我的流动相等液相参数就会有相应调整。所以还是希望直接用国标的方法来解决,不知道大家有没有遇到类似的情况啊?
你描述的不大清楚。
我觉得你可以在皂化后,先用正已烷将胆固醇提取出来,再将正已烷挥干,然后用你的流动相去溶解就可以了。 : Originally posted by veryoung at
你描述的不大清楚。
我觉得你可以在皂化后,先用正已烷将胆固醇提取出来,再将正已烷挥干,然后用你的流动相去溶解就可以了。 恩,我描述得是有点乱,太着急了。
国标中,蒸干的物质是用乙醇来溶解定容的,液相的流动相是甲醇。而现在我用乙醇就是无法溶解,尝试用甲醇也不溶。我想知道是什么原因哈~因为我不知道那些不能溶的到底是杂质还是胆固醇?
您说的方法我也早试过了,用正己烷溶解过,然后旋转蒸干,再用乙醇或甲醇结果还是无法溶解。
您碰到过类似的情况嘛? 胆固醇在甲醇里有一定的溶解度的,你只要保证能将其中的胆固醇溶解在甲醇里就可以了,其它的不溶解又没关系。正已烷与甲醇的极性相差很多,甲醇当然不可以把正已烷的提取浓缩物都溶解进去。 : Originally posted by veryoung at
胆固醇在甲醇里有一定的溶解度的,你只要保证能将其中的胆固醇溶解在甲醇里就可以了,其它的不溶解又没关系。正已烷与甲醇的极性相差很多,甲醇当然不可以把正已烷的提取浓缩物都溶解进去。 谢谢回答,现在也是采用了这个方法,另一个样品直接用甲醇定容,不溶解的部分我也暂时不管了,先进一针,因为胆固醇的量是知晓的,所以看看到底进样后胆固醇的量是多少,损失大不大。
继续查文献看不溶解的是什么啊。。。。
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3秒自动关闭窗口胆固醇修饰的RNA是可以溶于氯仿么? - 生物科学 - 小木虫 - 学术 科研 第一站
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胆固醇修饰的RNA是可以溶于氯仿么?
我在胆固醇修饰的RNA的水溶液中加入氯仿,分层之后去上层水溶液检测发现有RNA,我想知道在氯仿里面会不会也有RNA?会不会也有很多呢?
这个问题我想过,一直不知道为什么会有胆固醇修饰的RNA,你用这个RNA干嘛?
比如,你认为SDS,或者NP40之类的去垢剂,在酚抽之后会在哪一相呢?
胆固醇修饰的RNA就成了一个两亲分子,
还是,这种RNA不适合使用酚抽。 : Originally posted by biostar2009 at
这个问题我想过,一直不知道为什么会有胆固醇修饰的RNA,你用这个RNA干嘛?
比如,你认为SDS,或者NP40之类的去垢剂,在酚抽之后会在哪一相呢?
胆固醇修饰的RNA就成了一个两亲分子,
还是,这种RNA不适合使用酚 ... 我好像写错版块儿了,我是做药剂的,用的RNA是化学修饰的RNA,这样比较稳定。 提高RNA稳定性把2‘羟基封闭一下就可以了,这种很多的啊,2’-O-Me之类的。加胆固醇那么大的分子上去干嘛?
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