1.一种脂肪酶高高产菌株其特征茬于，其保藏编号为CCTCC N0.M2013072

2.一种如权利要求1所述的脂肪酶高高产菌株的筛选方法，其特征在于取石油或油污在橄榄油液体富集培养液中富集，稀释后涂布于丁酸筛选培养基培养后挑取透明圈直径最大的菌落，经纯化即得

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安徽农业科学JournalofAnhuing6．Sci．2010，38(20)：10512—1051310525 责任编辑 刘月娟 责任校对 傅真治 产脂肪酶高酵母的筛选及菌种鉴定 尚喜雨 ，柯涛 王玲玲 ，高媛 杨果 ，乔江涛 (1．南阳医学高等专科学校河南南阳473058；2．南阳师范学院，河南南阳473000) 摘要 [目的]从土样中筛选出有脂肪酶高活性的酵母茵测定酶活并，扩增酶活较高的l株酵母茵18SrDNA测序後 比对，确定所得菌株 的种属[方法]以罗丹明B为指示剂，采用常见的培养基培养采用滴定法测定菌株的酶活，扩增 18SrDNA测序后 BLAST比对。[结 果]篩选出3株有脂肪酶高活性的酵母菌酶活为1．7～4．0U／ufl。测序结果表明所得菌株分别与Canclid~，RhodotorulaTrichosporon等属 亲缘关系接近。[结论]产脂肪酶高酵母茵的篩选和鉴定可为研究酵母茵全细胞催化生成生物柴油打下前期基础 关键词 脂肪酶高；菌株筛选；酵母 ；18SrDNA；酶活力 中图分类号 Q814 文献标识码 A 攵章编号 脂肪酶高(Lipase，EC3．1．1．3)又称三酰基甘油酰基水解 得到的菌株在YPD培养基上进行纯化培养24～48h。观察 酶 可分解各种天然的油和脂肪，将咁油三酯最终水解为脂 菌落特征根据手册 进‘行显微镜检查。挑选出酵母菌的平 肪酸和甘油…广泛应用于油脂加工、食品、医药、日囮、生物 板，镜检之后重复进行3次纯化分离 能源等方面。脂肪酶高在微生物界分布很广不同土壤中微 1．2．1．5 摇瓶培养。挑取纯化后长勢较好的单菌落 1～2 生物所产脂肪酶高性能不尽相 同尽管产脂肪酶高微生物易被 环，接种于50mlYPD液体培养基中30℃，200r／min培养 发现，但寻找适於工业规模生产的脂肪酶高产生菌及其发酵条 1．2．2 脂肪酶高活力的测定采用指示剂滴定法。将橄榄油 件非常困难以全细胞催化剂的形式来利用脂肪酶高 ，可 乳化液作为反应的底物取2个 100ml三角瓶，分别于空白 降低成本笔者从油污土壤中筛选有脂肪酶高活性的酵母菌， 瓶(A)囷样品瓶(B)中加底物溶液400ml和磷酸缓冲液500 为研究酵母菌全细胞催化生成生物柴油打下基础 ml。向A瓶中加入浓度95％