热休克蛋白质DnaK的纯化及其二聚体性质研究--《天津科技大学学报》2016年03期
热休克蛋白质DnaK的纯化及其二聚体性质研究
【摘要】：通过定点突变技术构建了两个DnaK蛋白质突变体,研究腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)和腺苷二磷酸(ADP)条件对热休克蛋白质DnaK二聚体性质的影响.首先诱导表达DnaK蛋白质的两个突变体DnaK-A303C和DnaK-H541C,并采用硫酸镍亲和层析和阴离子交换层析对重组蛋白质进行纯化.对等量的DnaK蛋白质进行氧化交联处理,然后采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测ATP、ADP对DnaK二聚体的影响.研究表明DnaK突变体在ADP的存在下以同二聚体的形式存在,但是在ATP条件下能够形成异二聚体.由此为深入认识热休克蛋白质两个亚基之间的协同作用提供了实验依据.
【作者单位】：
【关键词】：
【基金】：
【分类号】：Q51【正文快照】：
热休克蛋白70s(heat shock proteins,Hsp70s)是从细菌到哺乳动物中均广泛存在的一类保守的蛋白质家族,是维持蛋白内稳态所必需的分子伴侣[1].在果蔬保鲜中,适当的热处理诱导产生的热休克蛋白能够提高果蔬抗冷性,降低冷害[2],并能通过帮助调节果蔬采后的生理生化代谢[3],保持果
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京公网安备75号蛋白质,脂质,DNA,RNA里含有哪些元素什么C,H,O,N,P,S乱七八糟的,搞不清哪个里有哪些
丶妆雪雪7fDc
蛋白质含C H O N P有的含S 脂质只含C H ODNA RNA只有C H O N P
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【求助】检测基因蛋白水平的表达有哪些方法？
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这个帖子发布于9年零89天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
除了western和 ELISA 这两种方法外，还有哪些检测基因蛋白水平表达的方法？
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1.如果知道蛋白分子量，可以做SDS-PAGE电泳2.如果表达的是酶，可以测定酶活3.如果是抗原，还可以用免疫沉淀线电泳
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呵呵～～我的意思是：检测刺激物刺激后细胞某种基因蛋白水平表达的差异是否有统计学意义，也就是说是定量的分析刺激前与刺激后基因蛋白水平的表达。做SDS-PAGE电泳是western的一部分哦。另外：ELISA是检测细胞上清的某种蛋白含量，western则是检测细胞内某种蛋白含量，二者的适用范围是否有差别？可否举例说明？
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如果已知分子量大小，只要表达的是预期分子量，可以通过SDSPAGE确认蛋白及表达量。当然如果要求更具体，用其他的免疫技术，或者基因表达分布图同样可以实现蛋白质活性水平测定。从统计学上说，对多次刺激物(更准确的应该叫抗原或免疫原)作用前后，检测同一蛋白的产生量是具有统计学意义的。可以在统计不少于20次后作P检验或成对检验。另外:ELISA 可不仅仅只能检测上清，WB也不只是智能检测胞内，只要有方法能将目的蛋白处理成两种方法学所需要的状态即可。如果说使用范围，那么ELISA肯定应用更广，WB在大部分情况下只能做半定量，且敏感性低于ELISA，成本也更高。
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回答：级别：特级教员 16:41:54来自：天星教育网
本题答案选 C
艾弗里实验
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