谷胱甘肽洗脱缓冲液 用什么调节PH
温柔_巍腽睝29
盐酸啊 如果你是用来洗脱GST融合蛋白的话,我昨天刚刚配置了溶液!
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标题：求教 延迟体积是什么?对液相有什么影响啊??/[原创]
混在上海 发表于： 0:56:00
求教 延迟体积是什么?对液相有什么影响啊??
wuhuan0428 发表于： 9:27:00
延迟体积跟滞后体积是一个意思，是指从泵很合部分到柱头这一段，影响延迟体积的参数包括泵、混合器，进样器和链接系统各部件的接头。延迟体积打，影响梯度的精度，进而影响分析的灵敏度，同时使运行时间周期延长，在低流速下尤其如此。死体积是指从进样器到检测器这一段没有被色谱填料所填充的部分，会导致峰展宽，峰型变差等等...死体积的测试一般使用在色谱柱上没有保留的探针测出死时间，然后乘以流速，就是死体积的意识
flytiger603 发表于： 18:35:00
会浪费时间，使物质扩展，峰变宽等。。。
只能减小，不能消除
byron1111 发表于： 19:51:00
&& 延迟体积和死体积的影响是不同的。
&& 延迟体积主要影响梯度洗脱。
redfoxwenfan 发表于： 21:43:00
延迟体积对梯度有影响
长江七号 发表于： 15:43:00
“延迟体积和死体积的影响是不同的。 延迟体积主要影响梯度洗脱。”那死体积呢？
还有，按照2楼色友提供的资料，延迟体积比死体积小是吗？我也不太搞得清这两个名词。
混在上海 发表于： 18:28:00
以下是引用wuhuan0428在 9:27:00的发言：延迟体积跟滞后体积是一个意思，是指从泵很合部分到柱头这一段，影响延迟体积的参数包括泵、混合器，进样器和链接系统各部件的接头。延迟体积打，影响梯度的精度，进而影响分析的灵敏度，同时使运行时间周期延长，在低流速下尤其如此。死体积是指从进样器到检测器这一段没有被色谱填料所填充的部分，会导致峰展宽，峰型变差等等...死体积的测试一般使用在色谱柱上没有保留的探针测出死时间，然后乘以流速，就是死体积的意识 &
&兄弟回答的很专业昂!& 感谢!
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共有&16&人回复了该问答样品忽然不出峰，是啥原因，求教?
本人采用岛津低压四元泵，使用两个通道：A是水相，B是乙腈，采用梯度0& & &
B:10& & & & & & & & 30& &
B:45& & & & & & & &
45& & B：85进样做有关物质，在高低浓度均出峰后，重复验证时，发现高低浓度峰的响应值很低，在0.7mv左右。之前高浓度在2500mv左右，试了几针都不行，其他设置都没动，不知咋回事？请教各位强人，先谢了！！！！！！！！！！！！！！！！
快速回复【花三五分钟，帮别人解决一个问题，快乐自己一天！】
回复于： 23:58:47
A相是磷酸氢二钾（0.001M）调pH7.0
回复于： 9:13:34
原来的峰是目标峰吗？会不会是溶剂峰啊？
回复于： 9:34:31
楼主能否把前后两张谱图传上来分析
回复于： 10:20:02
会不会操作过程有失误？
回复于： 10:45:49
有保护柱吗？建议拿掉保护柱试一试
回复于： 11:05:47
进过空白溶济吗?最好把图谱传上来看看!!
回复于： 11:31:40
看看氘灯能量是否不够了，换个仪器试试
回复于： 11:51:33
有点模糊没看明白！
回复于： 22:45:54
谢谢楼上，昨天0.2的流速乙腈过夜，今天换上流动相后，发现昨天有关物质主峰的出峰位置与今天完全不一样，昨天在1.7-2.2之间出峰，今天却在27min左右出峰，对照同事以前的同品种样品图谱，发现今天的图形是对的，感觉有点蒙，不知道昨天是咋回事，重点是条件完全一样明天去看看能不能把图谱给传上来，大家帮我分析分析，谢了
回复于： 10:33:20
估计是PH问题
回复于： 11:18:29
原文由 lixiaoxiu(lixiaoxiu) 发表:估计是PH问题不单纯的pH的问题
回复于： 12:08:50
呵呵,岛津的HPLC走那么高浓度的乙腈没什么问题吗？
回复于： 20:29:32
图我搞了半天都没复制下来，搞的都是片段，还打不开应该不是pH的问题，我是按照中国药典2010版的要求做的，而且第二天在做又正常了
回复于： 20:32:11
原文由 xgy2005(xgy2005) 发表:原来的峰是目标峰吗？会不会是溶剂峰啊？之前我已经进了空白，虽然溶剂峰和主峰有重叠，但响应值不一样，主峰的峰值高多了
回复于： 17:12:11
楼主所说的情况我遇到过：分析结果如下：1、氘灯能量突然下降――一般可能性不大。2、流路中产生了气泡――可以通过观察压力基线得到验证3、泵出了问题――观察压力变化，并测定一下单位时间的流出量4、某些碱性样品或者是样品中混入粘性较大物质，在色谱柱中洗脱延迟，一般这种情况，使用一些缓冲盐或者在有机相中加入一些不同极性的有机溶剂会起到很好的作用。
回复于： 10:47:55
没十分看懂说的内容。分析下：1、主峰原来250mv，现在0.7mv了？我问下，主峰位置是否有鬼峰，或者看下空白，此处有峰没。2、观察压力没有，往往这些看似神奇的背后都是些低级问题的组合或者只是现象的片面描述。压力是否正常，比如初始压力以及梯度过程中的压力。我更怀疑你的一个泵出问题了，即B泵根本就没流量。只是A泵在跑。3、相信检测器出问题的几率很小4、保留时间变了？？滞后了，说明流动箱组分出问题了。你测试下B泵把，历史经验证明。B泵是乙腈泵，出问题了。
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