为什么dna退火 TM值要设定为最高温度的一半 不可以最高温度吗
为什么dna退火 TM值要设定为最高温度的一半 不可以最高温度吗
网上复制粘贴的就算了吧，根本没明白到底问的是什么就抄了一堆，负点责任行么？回楼主：1、我不太明白你所说的“最高温度”是什么？是软件计算引物tm的结果？一般的计算结果都是刚好退火的温度，实验中一般采取比这个温度低5-10度的方法，但肯定不能是一半，那样太低了。其实退火温度低的目的主要是加强两条DNA间的结合效率，在一定的范围内，温度越低结合效率越高，但是超出了这个范围，就容易产生非特异性结合，形成我们不需要的DNA。2、其实科学界这种定义挺多的，比如”半衰期“，都是指某些反应进行到一半的时间或温度或别的什么参数。主要是因为这些反应最终的结果都是一样的，比如一段20bp长的DNA和200bp长的DNA，最高温度都是——比如——95度，如果选择这个温度，就无法体现出两者的差异了。但是在解链一半时，这个温度就与长度密切相关，可以表现出两者的差异，所以就采用了这个参数。有问题欢迎追问。
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　　退火温度为引物和模板结合时候的温度参数，当50%的引物和互补序列表现为双链DNA分子时的温度.它是影响PCR特异性的较重要因素。在理想状态下，退火温度足够低，以保证引物同目的序列有效退火， 同时还要足够高，以减少非特异性结合。合理的退火温度从55℃到70℃。退火温度一般设定比引物的 Tm低5℃。　　在模板变性后温度快速冷却至40℃～60℃(某个退火温度)的时候，可使引物和模板发生结合。由于模板DNA 比引物复杂得多，引物和模板之间的碰撞结合机会远远高于模板互补链之间的碰撞，这就使PCR后期的过程成为可能。　　退火温度与时间，取决于引物的长度、碱基组成及其浓度，还有靶基序列的长度。对于20个核苷酸，G+C含量约50%的引物，55℃为选择最适退火温度的起点较为理想。引物的复性温度可通过以下公式帮助选择合适的温度：　　Tm值(解链温度)=4(G+C)+2(A+T)　　复性温度=Tm值-(5～10℃)　　在Tm值允许范围内， 选择较高的复性温度可大大减少引物和模板间的非特异性结合， 提高PCR反应的特异性。复性时间一般为30～60sec，足以使引物与模板之间完全结合。
tm值为什么规定是一半温度 不可以是最大温度
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X射线检查Ⅰ：对内外焊缝进行100%的X射线工业电视检查，采用图象处理系统以保证探伤的灵敏度；10. 扩径：对埋弧焊直缝钢管全长进行扩径以提高钢管的尺寸精度，并改善钢管内应力的分布状态；11. 水压试验：在水压试验机上对扩径后的钢管进行逐根检验以保证钢管达到标准要求的试验压力，该机具有自动记录和储存功能；12. 倒棱：将检验合格后的钢管进行管端加工，达到要求的管端坡口尺寸；13. 超声波检验Ⅱ：再次逐根进行超声波检验以检查直缝焊钢管在扩径、水压后可能产生的缺陷；14. X射线检查Ⅱ：对扩径和水压试验后的钢管进行X射线工业电视检查和管端焊缝拍片；15. 管端磁粉检验：进行此项检查以发现管端缺陷；16. 防腐和涂层：合格后的钢管根据用户要求进行防腐和涂层。ASTM A269一般设备用无缝和焊接奥氏体不锈钢管ASTM A312无缝和焊接奥氏体不锈钢管ASTM A213无缝铁素体和奥氏体合金钢锅炉、过热器和换热器管ASTM A249锅炉、过热器、换热器和冷凝器用焊接奥氏体钢管ASTM A268一般设备用无缝和焊接铁素体与马氏体不锈钢管ASTM A269一般设备用无缝和焊接奥氏体不锈钢管ASTM A270卫生设施用无缝钢和焊接奥氏体不锈钢管ASTM A271精炼用奥氏体无缝铬镍合金钢管ASTM A358高温用电熔焊奥氏体铬镍合金钢管ASTM A381高压输送用金属弧焊钢管ASTM A409腐蚀场所或高温下使用的焊接大口径奥氏体钢管ASTM A778焊接未退火的奥氏体不锈钢管形制品ASTM A789普通设备用无缝与焊接铁素体/奥氏体不锈钢管ASTM A790无缝与焊接铁素体/奥氏体不锈钢管ASTM A791不退火铁素体焊接不锈钢管ASTM A803焊接铁素体不锈钢给水加热器管ASTM A813单或双焊接奥氏体不锈钢管结构用不锈钢管ASTM A554焊接的无缝钢机械管（圆形，方矩形，椭圆型）ASTM A511无缝不锈钢机械管ASTM A632通用无缝和焊接奥氏体不锈钢管(小直径)& ASTM A908 不锈钢针管STM A249 锅炉过热器换热器和冷凝器用焊接奥氏体钢管配管用碳素和合金钢管郑重承诺： 保证以最好的产品、最优的质量、最低的价格、最完善的服务来答谢新老顾客的信赖。公司已开通一下服务，&(1) 批零兼营，一支起售。&(2) 客户能够随意选择本人所需的长度或其他央求。&(3) 提供气割、锯切等配套效劳。&(4) 代订/购各类钢厂合同或特殊规格&(5) 调剂本库暂缺的规格，省去您奔走采购的辛劳。&(6) 运输量大可直发您指定地点。&(7) 全年无休，随到随提，仓库全天候装车。&(8) 所售钢管，公司担任全面质量跟踪，为您扫除后顾之忧。&(9) 本公司所供管材均附钢厂原始材质书，可收三个月承兑汇票。（10）可代订天钢、冶钢、西宁、包钢产品无需全款订货。（11）进出口报关、商检事宜及国内公路、铁路运输。 交货状态 代号 说 明 冷加工 / 硬 BK 最后冷加工之后不进行热处理，从而管子只可进行很小的变形 冷加工 / 软 BKW 氟碳喷涂、聚脂喷涂、粉末喷涂、丙烯酸喷涂、木纹、石纹喷涂、铝幕墙板、异型铝板、各款建筑型材、工业型材、屏风、五金什件、铝天花、交通工具组件、高温洁具等。本本公司是专业从事国际贸易和承接大型工程的本公司。产品畅销国内20多个省市自治区，并批量出口至美国、意大利、澳大利亚、俄罗斯、土耳其、秘鲁、希腊、泰国、韩国、菲律宾等二十多个国家和地区，逐渐形成了稳固的销售网络。 不锈钢按组织结构分，分为马氏不锈钢（包括沉淀硬化不锈钢）、铁素体不锈钢、奥氏体不锈钢和奥氏体加铁素体双相不锈钢等四大类；叉杆用无缝管用于火车提速用的CR转向架交叉杆 .最后热处理之后进行小变形量的冷加工，对钢管端部加工时允许有限的冷变形（例如：弯曲、扩口） 冷加工后 消除应力退火 BKS 最后冷加工后在 Ac 1 以下进行退火，以消除冷加工应力 退火 GBK 最后冷加工之后，钢管在保护气氛下进行的完全退火 正火 NBK 最后冷加工之后，钢管在保护气氛下进行的正火 MonoMono是一个由Novell公司（先前是Ximian）主持的项目。该项目的目标是创建一系列符合ECMA标准（Ecma-334和Ecma-335）的.NET工具，包括C#编译器和共通语言运行平台。与微软的.NET Framework不同，Mono项目不仅可以运行于WINOOWs系统上，还可以运行于Linux，FreeBSD，Unix，Mac OS X和Solaris。Mono现由Novell持有双重许可，这和Qt和Mozilla应用程序包的情况相似。Mono的C#编译器及其相关工具发布于GNU General Public License（GPL）之下，其运行时库发布于GNU Lesser General Public License（LGPL）之下，其类库发布于MIT License之下。这些均是开源协议因此Mono是一个开源软件。如果你打算向Mono贡献你的源码，则你须签署一个版权分派给Novell以允许它将这些代码在其它协议下再申请许可，从而允许Novell保留其双重许可的能力来持有Mono的商业协议。
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X射线检查Ⅰ：对内外焊缝进行100%的X射线工业电视检查，采用图象处理系统以保证探伤的灵敏度；10. 扩径：对埋弧焊直缝钢管全长进行扩径以提高钢管的尺寸精度，并改善钢管内应力的分布状态；11. 水压试验：在水压试验机上对扩径后的钢管进行逐根检验以保证钢管达到标准要求的试验压力，该机具有自动记录和储存功能；12. 倒棱：将检验合格后的钢管进行管端加工，达到要求的管端坡口尺寸；13. 超声波检验Ⅱ：再次逐根进行超声波检验以检查直缝焊钢管在扩径、水压后可能产生的缺陷；14. X射线检查Ⅱ：对扩径和水压试验后的钢管进行X射线工业电视检查和管端焊缝拍片；15. 管端磁粉检验：进行此项检查以发现管端缺陷；16. 防腐和涂层：合格后的钢管根据用户要求进行防腐和涂层。ASTM A269一般设备用无缝和焊接奥氏体不锈钢管ASTM A312无缝和焊接奥氏体不锈钢管ASTM A213无缝铁素体和奥氏体合金钢锅炉、过热器和换热器管ASTM A249锅炉、过热器、换热器和冷凝器用焊接奥氏体钢管ASTM A268一般设备用无缝和焊接铁素体与马氏体不锈钢管ASTM A269一般设备用无缝和焊接奥氏体不锈钢管ASTM A270卫生设施用无缝钢和焊接奥氏体不锈钢管ASTM A271精炼用奥氏体无缝铬镍合金钢管ASTM A358高温用电熔焊奥氏体铬镍合金钢管ASTM A381高压输送用金属弧焊钢管ASTM A409腐蚀场所或高温下使用的焊接大口径奥氏体钢管ASTM A778焊接未退火的奥氏体不锈钢管形制品ASTM A789普通设备用无缝与焊接铁素体/奥氏体不锈钢管ASTM A790无缝与焊接铁素体/奥氏体不锈钢管ASTM A791不退火铁素体焊接不锈钢管ASTM A803焊接铁素体不锈钢给水加热器管ASTM A813单或双焊接奥氏体不锈钢管结构用不锈钢管ASTM A554焊接的无缝钢机械管（圆形，方矩形，椭圆型）ASTM A511无缝不锈钢机械管ASTM A632通用无缝和焊接奥氏体不锈钢管(小直径)& ASTM A908 不锈钢针管STM A249 锅炉过热器换热器和冷凝器用焊接奥氏体钢管配管用碳素和合金钢管郑重承诺： 保证以最好的产品、最优的质量、最低的价格、最完善的服务来答谢新老顾客的信赖。公司已开通一下服务，&(1) 批零兼营，一支起售。&(2) 客户能够随意选择本人所需的长度或其他央求。&(3) 提供气割、锯切等配套效劳。&(4) 代订/购各类钢厂合同或特殊规格&(5) 调剂本库暂缺的规格，省去您奔走采购的辛劳。&(6) 运输量大可直发您指定地点。&(7) 全年无休，随到随提，仓库全天候装车。&(8) 所售钢管，公司担任全面质量跟踪，为您扫除后顾之忧。&(9) 本公司所供管材均附钢厂原始材质书，可收三个月承兑汇票。（10）可代订天钢、冶钢、西宁、包钢产品无需全款订货。（11）进出口报关、商检事宜及国内公路、铁路运输。 交货状态 代号 说 明 冷加工 / 硬 BK 最后冷加工之后不进行热处理，从而管子只可进行很小的变形 冷加工 / 软 BKW 氟碳喷涂、聚脂喷涂、粉末喷涂、丙烯酸喷涂、木纹、石纹喷涂、铝幕墙板、异型铝板、各款建筑型材、工业型材、屏风、五金什件、铝天花、交通工具组件、高温洁具等。本本公司是专业从事国际贸易和承接大型工程的本公司。产品畅销国内20多个省市自治区，并批量出口至美国、意大利、澳大利亚、俄罗斯、土耳其、秘鲁、希腊、泰国、韩国、菲律宾等二十多个国家和地区，逐渐形成了稳固的销售网络。 不锈钢按组织结构分，分为马氏不锈钢（包括沉淀硬化不锈钢）、铁素体不锈钢、奥氏体不锈钢和奥氏体加铁素体双相不锈钢等四大类；叉杆用无缝管用于火车提速用的CR转向架交叉杆 .最后热处理之后进行小变形量的冷加工，对钢管端部加工时允许有限的冷变形（例如：弯曲、扩口） 冷加工后 消除应力退火 BKS 最后冷加工后在 Ac 1 以下进行退火，以消除冷加工应力 退火 GBK 最后冷加工之后，钢管在保护气氛下进行的完全退火 正火 NBK 最后冷加工之后，钢管在保护气氛下进行的正火 MonoMono是一个由Novell公司（先前是Ximian）主持的项目。该项目的目标是创建一系列符合ECMA标准（Ecma-334和Ecma-335）的.NET工具，包括C#编译器和共通语言运行平台。与微软的.NET Framework不同，Mono项目不仅可以运行于WINOOWs系统上，还可以运行于Linux，FreeBSD，Unix，Mac OS X和Solaris。Mono现由Novell持有双重许可，这和Qt和Mozilla应用程序包的情况相似。Mono的C#编译器及其相关工具发布于GNU General Public License（GPL）之下，其运行时库发布于GNU Lesser General Public License（LGPL）之下，其类库发布于MIT License之下。这些均是开源协议因此Mono是一个开源软件。如果你打算向Mono贡献你的源码，则你须签署一个版权分派给Novell以允许它将这些代码在其它协议下再申请许可，从而允许Novell保留其双重许可的能力来持有Mono的商业协议。
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