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【求助/交流】真核载体能否在原核细胞内表达
如题，最近再做真核载体构建与表达，连接好的真核表达载体能在大肠杆菌中表达么？因为后续要做WB，需要相应抗体，蛋白抗原的获取应该怎么大量得到？望各位前辈指教！
用质粒做载体不就可以在E coli 中表达了么
貌似将Ecoli 大规模培养，然后提取出蛋白就可以做WB了
这关键还是看你做什么蛋白的表达，然后就有不同的提取方法，应该有相关的文献可以查到吧 我现在重组的是真核表达质粒，目的是转染Hela细胞，然后裂解Hela细胞做WB，现在的问题是检测蛋白表达时候要用到一抗。就需要免疫小鼠制备多抗，我想问的是我的真核重组质粒能否在大肠杆菌中大量表达我的目的蛋白？ 真核载体和原核载体的区别主要有哪些？ 真核和原核的启动子不同，识别不了。真核的不能表达 应该需要构建原核表达载体吧 不太熟悉，只能给个提示，穿梭质粒。 应该不可以，即使是穿梭载体，也只能在大肠杆菌中复制，而不能表达。 谢谢各位指教了！已经明了了。看来我必须的重新连个原核载体了。谢谢各位了
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真核表达与原核表达的德国小蠊变应原Blag2蛋白结构的光谱学研究
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官方公共微信请问，真核表达载体中T7启动子的作用(启动子,真核表达载体,原核表达)
05:23:41&&&来源：&&&评论：&&
[请问，真核表达载体中T7启动子的作用(启动子,真核表达载体,原核表达)] 请教一下各位前辈，真核表达载体中（比如PCI,PCDNa)T7启动子有什么作用？小弟弱弱问一句，可以用来做原核表达吗？ 关键词:[启动子 真核表达载体 原核表达]…
请教一下各位前辈，中（比如PCI,PCDNa)T7启动子有什么作用？小弟弱弱问一句，可以用来做原核表达吗？
回复T7 sequences could be used for sequencing primer sites in pCI and pc vectors.回复T7 promoters in the pCI and pc two vectors can drive transcription of the downstream coding sequences in the presence of T7 RNA polymerase. This can be done in most in vitro transcription/translation reactions. The transgene in pCI or pcDNA could be expressed If T7 RNA polymerase is coexpressed along with the vector in bacterial host cells. The Ribosome recognition site and LacZ inducible system, however, may be required for high levels of expression.回复非常感谢楼上的解答回复问问如何用T7启动子体外转录呢？也想请教下如何设计带有T7启动子的某序列的引物？T7引物和T7启动子是相同还是互补序列呢？另如何检测转录是否成功？ O(∩_∩)O谢谢
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简述原核生物与真核生物在复制，转录，翻译及表达调控中的异同
与真核生物在复制，转录，翻译及表达调控中的异同
真核生物中编码蛋白质的基因通常是间断的、不连续的，由于转录时内含子和外显子是一起转录的，因而转录产生的信使RNA必须经过加工，将内含子转录部分剪切掉，将外显子转录部分拼接起来，才能成为有功能的成熟的信使RNA。而原核生物的基因由于不含有外显子和内含子，因此，转录产生的信使RNA不需要剪切、拼接等加工过程。
再有，原核生物基因的转录和翻译通常是在同一时间同一地点进行的，即在转录未完成之前翻译便开始进行。如大肠杆菌乳糖分解代谢过程中，三个结构基因的转录和翻译就是同时在细胞质中进行的。真核生物由于有细胞核，核膜将核质与细胞质分隔开来，因此，转录是在细胞核中进行的，翻译则是在细胞质中进行的。可见,真核生物基因的转录和翻译具有时间和空间上的分隔。上述真核生物基因转录后的剪切、拼接和转移等过程，都需要有调控序列的调控，这种调控作用是原核生物所没有的。
参考资料：
原核生物的RNA聚合酶，虽然结构叫复杂，但只需要一种。
利福平只能抑制细菌DNA转录合成RNA，不能抑制真核生物的转录。
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